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34 生 物 技 术 2012年 22( 3)
青杄 FKBP12基因原核表达和 多克 隆抗体的制备
黄桂雪，王雨涵 ，张凌云*
( 北京林业 大学森林培育与保护教育部重点实验室，北京 100083)
: : FKBP12， FKBP12� � : PCR
摘要 目的 制备青杄 基因的多克隆抗体 为进一步分析 的蛋 白定位 表达等提供 基础 方法 采用 方
FKBP12cDNA， pET-48b， BL21� IPTG，
法扩增 基因得到其 全长 序列 并将其克隆至原核 表达载体 中 转化 入 菌株 经 诱导 表达
33kD，SDSWesternblotting� ，
了分子量约为 的重组蛋 白 和 检 测鉴定表 达产物 此蛋 白经亲和纯 化后 作为 抗原注 射新西
， � : ， FKBP121:729000，ELISA
兰兔 进行抗体制备 结果 成功获取了多克隆抗体 制备的 兔抗血清效价在 以上 结果表 明融合蛋 白
� ELISA， FKBP ， 16ng/
具 良好的免疫原性 间接 法检测纯化 后抗体 效价 表 明纯 化后抗 蛋 白兔多克隆抗 体效价高 检测 灵敏 度为
mL� : ， �
结论 所制备的抗体能满足后续试验要求的效价值 为进一步研究提供基础
: ; FKBP12; ; ;
关键词 青杄 基因 原核表达 蛋 白纯化 多克隆抗体
中图分类号: Q786文献标识码: Adoi: 10.3969/j.issn.1004-311X.2012.03.62
P����������E���������������������������
FKBP12G������P������������I��P���������A���������
HUANGGui-xue，WANGYu-han，ZHANGLing-yun*
( KeyLaboratoryofForestSilvicultureandConservationoftheMinistryofEducation，BeijingForestryUniversity，Beijing100083)
A�������: O��������: Thepolyclonalantibodiescanbeusedforfurtherinvestigation，whichestablishthefoundationforinvestigatingthe
functionoftheFKBP12geneinproteinlevel.M�����: ThecDNAencodingfull-lengthofFKBP12wasamplifiedbyPCRandwasinsert-
edintovectorpET-48b.TherecombinantplasmidFKBP12-pET48bwasthentransformedintoE.
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