炭样小单孢菌JXNU-1产抗生素对G~-的体外抗菌作用及其机理的初步研究.pdfVIP

第 37卷 第 2期 2013年 3月 江西师范大学学报(自然科学版) Journal of Jiangxi Normal University(Natural Science) Vo1．37 No．2 Mar．2013 文章编号：1000-5862(2013)02-0162-04 炭样小单孢菌 JXNU一1产抗生素对 G一的体外 抗菌作用及其机理的初步研究 彭伟梦，黄运红，李 瑾，高兴强，龙中儿 (江西师范大学生命科学学院，江西 南昌 330022) 摘要：基于土壤中分离到的一株具广谱抗菌活性的炭样小单孢菌JXNU．1，研究了JXNU—l所产抗生素对 G 的体外抗菌作用．研究结果表明：炭样小单孢菌JXNU一1所产抗生素对产气肠杆菌、伤寒沙门氏菌、铜 绿假单孢菌、福氏志贺氏菌等常见G一细菌均有抗菌作用，其最低杀菌浓度一般是最低抑菌浓度的8—16 倍．杀菌曲线表明其对 G一的杀菌作用非常快速，8 h的杀菌率已超过 90％．进一步的研究表明抗生素抗 G一的作用机理在于抑制细菌蛋 白质的合成，进而抑制细胞的分裂． 关键词：炭样小单孢菌；抗生素；革兰氏阴性菌；抗菌作用 中图分类号：Q 939．9 文献标志码：A 0 引言 炭样小单孢菌(Micromonospora carbonacea)，在 分类学上属于放线细菌纲(Actinobacteria)，放线菌 目(Actinomycetales)，小单孢菌科 (Micromonospora- ceae)，小单孢菌属(Micromonospora)．炭样小单孢菌 最初由 Luedemann和 Brodsky于 1964年分离 ， 并研究发现该菌可以产生一多组份的糖类衍生物抗 生素——扁枝衣霉素(Everninomicin)复合物 ，从 海洋中分离获得一株炭样小单孢菌也可产生有抗肿 瘤和免疫抑制作用，但没有抗细菌作用的染料木素 和大豆黄素 ．目前，暂未见有关炭样小单孢菌发 酵产其他活性物质的文献报道． 本课题组从土壤样品中分离获得一株具有广谱 抗菌作用的炭样小单孢菌 JXNU一1(Micromonospora carbonacea，JXNU一1) J，其对水稻白叶枯病菌(Xan— thomonas oryzae pv．oryzae，Xoo)等植物病原菌也有 较强的抗菌活性 J，其产抗生素的发酵工艺过程、 影响发酵产抗生素的因素及其作用规律在文献 [1O]中作了系统探讨，文献[11]优化了分离纯化抗 生素的工艺，并获得了分析纯的抗生素．该抗生素经 紫外一可见光谱、红外光谱、质谱及核磁共振谱等仪 器分析确定为核苷类抗生素．本文以产气肠杆菌 (Enterobacter aerogenes)、伤寒沙门氏菌(Salmonela typhi)、福氏志贺氏菌(Shigelaflexneri)、铜绿假单孢 菌(Pseudomonas aeruginosa)等革兰氏阴性菌(G一) 为例，报道它的体外抗菌活性及其作用机理，为该抗 、 生素的开发利用提供理论依据． 1 实验材料与方法 1．1 实验菌种 炭样小单孢菌JXNU．1、产气肠杆菌(Enterobact— er aerogenes)、伤寒沙门氏菌(Salmonela typhi)、福氏 志贺氏菌(Shigela flexneri)和铜绿假单孢菌(Pseud- omonas aeruginosa)均由本实验室提供． 1．2 培养基 ． 1．2．1 牛肉膏蛋白胨培养基(供细菌活化培养用) 牛肉膏 3 g，蛋白胨 10 g，NaC1 5 g，琼脂 15～ 20 g，水 1 L，pH值为7．0～7．2，121℃灭菌 20 min． 1．2．2 高氏 I号培养基(供斜面保存炭样小单孢 菌用) FeSO4 0．01 g，可溶性淀粉20 g，KNO3 1 g， K2HPO4 0．5 g，NaC1 0．5 g，MgSO4 0．5 g，琼脂20 g， 水 1 L，调节pH值为7．2～7．4．配置时，先用少量冷 水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热， 边搅拌边加入其他成分，待溶化后补足水分至1 L， 收稿 日期 ：2012—12-19 基金项目：国家自然科学基金和江西省自然科学基金(20122BAB204008)资助项目． 通信作者：龙中儿(1970一)，男，江西崇仁人，教授，博士，主要从事基础和应用微生物学研究． ～ 第2期 彭伟梦，等：炭样小单孢菌JXNU一1产抗生素对G一的体外抗菌作用及其机理的初步研究 163 121 oC灭菌 20 min． 1．2．3 种子培养基(供炭样小单孢菌种子培养用) 黄豆粉 12．5 g，蔗糖 22．5 g，CaCO3 2 g，NaC1 1 g， Na2SO4 0．1 g，K2HPO4 0．2