FISH的技术在血液肿瘤中应用.pptVIP

上海市第一人民医院 Shanghai First People’s Hospital;FISH的定义;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH技术原理;FISH的种类;FISH探针的种类和用途;血液肿瘤FISH检测常见探针类型;FISH在血液肿瘤中的应用;一、诊断和鉴别诊断;一、诊断和鉴别诊断;举例 男性46岁患者，2003.2.24内科急诊发现白细胞增高（25×109/L） 。 骨髓显示粒系极度增生，红系、巨核系以及血小板增生尚可，NAP积分49分，核型分析结果为46,XY[20]。 随访3年，其白细胞始终维持在20-30×109水平。;2006.5.4发现白细胞增高至170×109，血小板511×109，血红蛋白118g/dL。 骨髓象显示早幼粒细胞占6%，中幼粒细胞占13%，核型分析未见分裂象。 BCR-ABL 210基因阴性，经单融合FISH探针证实骨髓59%细胞BCR-ABL融合基因阳性。 接受格列卫治疗，2006.9.7复查，FISH阳性细胞比例降低至7.4%，2006.10.23以后的复查结果FISH都为阴性。;其他常用于诊断的探针还有：PML/RARA，AML1/ETO，CBFβ，TEL/AML1等。 以CBFβ探针为例： 发生16号染色体倒位的细胞其荧光信号由2F变成1F/1R/1G。 有研究表明CBFβ探针对inv(16)导致的CBFβ-MYH11融合基因的检出率与分子生物学的方法相当。;一、诊断—急性淋巴细胞白血病;一、诊断—淋巴瘤;鉴别诊断，以BCR/ABL探针为例： 额外信号的BCR/ABL探针（ES） 根据荧光信号的模式不同，可以鉴别MBCR断裂点（P210）和mBCR断裂点(P190)。 MBCR断裂点的细胞呈现1Y/2R/1G的信号模式，而mBCR断裂点的细胞则是2Y/1R/1G的信号模式。;一、鉴别诊断;一、鉴别诊断;;FISH共检出了23例异常（76.7%）。 完成核型分析的18例中仅2例检出异常。 正常核型的9例中，FISH检出7例异常。 未见分裂象的7例中，FISH检出5例异常。 而且这些由FISH检出的异常克隆比例基本都在20%以上。;MM中的应用 MM的骨髓瘤细胞有丝分裂指数低，且由于骨髓浸润程度不同，常规核型分析异常检出率相对较低，检出的异常往往是超二倍体和/或复杂核型。 MM的遗传学异常同样被认为与预后相关，13q14的缺失被认为是复发和预后不良的独立危险因素，1q21扩增、p53缺失也都提示预后不良。;二、治疗和预后分层;MDS中的应用 FISH在MDS中的应用价值???对较低。 MDS的患者大多能成功完成核型分析，且被分析的分裂象数目和质量尚可。 FISH检测普遍采用组合探针（-5/5q-、-7/7q-、+8、20q-和-Y）对五大类常见异常进行分析。;在我院新近完成的70例MDS患者的研究中： 核型和FISH分别检出21例和22例异常，异常检出率相当。 核型异常但FISH正常的6例，这6例异常均发生于探针覆盖范围以外区域。 核型正常而FISH异常7例，这7例的异常克隆细胞比例大多较低（10%）。 对于未见分裂像和正常核型的患者有一定的应用价值，能提高小克隆异常的检出率。;三、监测疗效;FISH在异性别异基因造血干细胞移植后供受者嵌合比例的监测中也有非常重要的价值。 比较未分选细胞的STR和FISH两种技术，FISH的敏感性和准确度更高，对于早期提示复发或排斥反应的临床应用价值更大。;小 结;小 结;上海市第一人民医院 Shanghai First People’s Hospital