试剂盒使用说明书.PDFVIP

大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 1 使用目的： 本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），药物、血清和尿样中大 肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）残留的定量检测。 2 实验原理 本试剂盒采用竞争 ELISA 方法，在微孔板包被有大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5 α）偶联抗原，加入大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）标准品或样品，游离大肠杆 菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）与微孔条上预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）偶联抗原互相竞争抗大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）抗体酶标记物， 用 TMB 底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在 450nm 波长下进行检测， 吸光值与样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）含量成反比，通过标准曲线计算 样品中大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）的含量。 3 试剂盒组成 3.1 预包被的大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12 孔×8条）。 3.2大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/ml, 0.1 ug/ml,0.3 ug/ml,0.9 ug/ml,2.7 ug/ml,8.1 ug/ml 3.3 抗大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）抗体酶结合物：1 瓶（6ml）。 3.4 显色液 A：1 瓶（6ml）。 3.5 显色液 B：1 瓶（6ml）。 3.6 终止液：1 瓶（6ml），2M 硫酸。 3.7 样本稀释液：1 瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。 3.8 浓缩洗涤液：1 瓶（20×，20ml），用于洗板。 3.9 说明书一份。 4 需要而未提供的材料 4.1 设备 4.1.1波长450nm酶标仪。 4.1.2粉碎机。 4.1.3量筒。 4.1.4振荡器。 4.1.5漏斗。 4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。 4.1.7微量移液器。 4.2 试剂 4.2.1去离子水或蒸馏水。 4.2.2 甲醇。 5 贮存 5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻 1 5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存 6 注意事项 6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。 6.2 不要使用过期试剂盒。 6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。 6.4 标准品中含有大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α），使用时应特别注意，操作时 应带手套。 6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。 6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。 6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响 实验结果。 6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果 6.9 混合试剂时应避免起泡。 7 工作液准备 7.1大肠杆菌菌体蛋白残留量（E.coli DH-5α）标准品溶液：0ug/ml, 0.1 ug/ml,0.3 ug/ml,0.9 ug/ml,2.7 ug/ml,8.1 ug/ml 7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用 7.3 样本稀释液：用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用 7.3 显色剂：已备用，避免光线直照 7.4 反应终止液：已备用 8 样品处理：（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会 出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存） 一般样品处理 8.1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液 8.2强力振荡3分钟 8.3用Whatman No 1滤纸过滤 8.4取100μl处理后的样品，加入4