基因组编辑技术——CRISPR／Cas系统.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 杭 州师 范大学 学报 ?自然科学版 ?? ?????????．?? ???? 年 ?月? ????????????????????????????????????????????????????????? ???．????? 基 因组 编辑 技 术— — ??????／???系统? 陈勇龙?，黄华 荣?，唐平平。，羊雪芹?，李 斐雪?，许? 杰?，张遵义? ??．杭 州 师 范 大 学 发 育 与再 生研 究所 ，浙 江 杭 州 ??????；?．石 门 中心 ??生 院 ，浙 江 嘉兴 ??????? 摘 要 ：基 因定 点 编辑 技 术 包 括 基 于 胚 胎 干 细 胞 及 同 源 基 因 片 段 重 组 的基 因 打 靶 技 术 、锌 指 结 构 ?????、? 类 转 录激 活 因子 效 应 物 ???????以及 ??????／???系 统 ．??????／???系 统 具 有 操 作 简 单 、突 变 率 高 、成 本 低 ，? 同 时可 针 对 多 个 基 因等 优 点 ；该 技 术 可 进 行 定 点修 饰 ，如 敲 除 、插 入 、替 换 等 ．目前 ??????／???系 统 已 成 功 应? 用 到小 鼠 、人 类 细胞 、线 虫 、果 蝇 、斑 马 鱼 、拟 南 芥 、水 稻 和 猴 等 ．文 章 将 对 基 因 修 饰 技 术 发 展 脉 络 做 统 一 梳 理 ，并? 将 系统 阐述 ??????／???系 统 的 原 理 、应 用 以及 该 技 术 的优 缺 点 ．? 关 键 词 ：基 因 修 饰 ；??????／???系 统 ；基 因编 辑? 中 图分 类号 ：???：???? 文 献标 志码 ：?? 文章 编 号 ：????—????????????????????? 从 ??世纪 ??年代 沃森 和克 里克 揭示 了 ??? 分子 的双 螺旋 结 构 开始 ，人 们 真正 从 分 子 水平 认 识 了? 基 因 ，开启 了通 过改造 基 因来 改造 生 物 的科 学 实 践．????年 ，??????利用 显 微 注射 的方 法 获 得 了第 一 例? 转基 因小 鼠，标 志着 动物转 基 因技 术 的建立 ，也是 基 因编辑技 术 的开始 口?．? 基 因编辑技术是 人们开启认识基 因功能 的钥匙．早期研 究基 因功 能主要 是利 用 随机插 入方式 将外 源基? 因整合 到生物 体 内或是通过 同源重组方式删 除 目的基 因?图 ??，以获 得遗 传动物 修饰模 型 ，这些技 术有 诸多? 不利如周期 长 、成本高 、技术体 系复杂等 ；随着人类基 因组计划 的完 成 ，将 已知基 因的序列 与功 能联系 在一起? 的功能基 因组 学研究成 为后基 因组时代 的一 大研究 热点．????入 选《????????十大重要 科学 进展 之一— — 基? 因组编辑技术??，方 便了研究者构建基 因修饰模型 生物 ；这些技术 可分 为三类 ：锌指核酸 酶??????????????????—? ???，????、类转录激活 因子效应物核酸 酶????????????????????????????????????????????????，???????和 成簇规? 律 间隔短 回文重复与 ???蛋 白??????????????????????????????????????????????????????????，??????／????．这些? 技术 的应用 提高 了基 因