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现代食 品科技? ??????????????????????????????????? ????,???.??,??.??
棘孢 曲霉? 一葡萄糖苷酶?的乳酸 乳球菌表达?
黄建飞,成丽丽,李娜,司丽芳,罗立新?
?华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州 ????????
摘要 :构建棘孢 曲霉?.葡萄糖苷酶食品级分泌表达载体并在乳酸乳球?????????.??????????????中实现表达。通过???扩增?
?.?????????????基 因组 中分泌信号??????、质粒???????的乳链菌肽 ???????抗性基 ?????和质???????????????的棘孢 曲霉?一葡萄糖?
苷酶基因????,???方法连接后获得 片??????.?????????,将其克隆到质粒?????中,?????法转?? ??.?????????,测序鉴 定后将该?
片段连接到大肠杆菌一乳酸菌穿梭质粒??????中并转?? ??.????????.????,得重组子?.????????.????/??????—?????一?????????。通过?
???方法敲除质粒??????.?????.???????????红霉素抗性基 因以构建食品级分泌载???????????????????????,将其 电转到?.???????
??????中。转化子?.????????一????/????????????一?????????能将? 葡萄糖苷 酶分泌到胞外使 七叶苷平板显 色,?.????????????/?
??????.?????.???????????在?????/????????上生长,经??.???验证?.葡萄糖苷酶在乳酸乳球菌 中实现表达。表明分泌型表 达载体构?
建成功 ,为其在乳酸乳球菌中实现食品级活性表 达奠定基础。?
关键 词:棘孢 曲霉;? 葡萄糖苷酶;大肠杆菌;分泌表达;乳酸乳球 菌?
文章篇号:????.???????????.??.??? ’?
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