R-2-氯丙酸脱卤酶的定向进化.pdfVIP

第 ??卷第 ?期? 生 物 加 工 过 程? ???．?????．?? ????年 ?月? ????????????????????????????????????????? ???．????? ???：??．????／?．????．????— ????．????．??．???? 一 ?一氯 丙 酸脱 卤酶 的定 向进 化? 秦迎 春 ，刘? 鹏 ，杨 立荣 ，徐? 刚 ，吴坚平? ?浙江 大 学 化 学工程 与 生物工 程 学系 ，杭 州 ???????? 摘 要 ：通过 易错 ???手段将 ?一?一氯 丙酸脱 卤酶定 向进化 ，并使 用基 于 ??一浓度显 色反应 的高通量 筛选得到有? 效 突变 子 库 ，发 现 突 变 子 ?????? — ??和 ??????— ??的 酶 比活 力分 别 提 高 ??．?％ 和 ??．?％ 。通 过 ?????对酶 与? 底 物进 行 分 子 对 接 显 示 ，??????— ??的 活 化 能 下 降 ?．????????／???，??????— ??的 活 化 能 下 降 ?．????????／???。? 由于酶和底物 ?一?一氯丙酸的活化能下降 ，亲和 能力提 高 ，从而提 高酶的 比活力。? 关 键 词 ：?一氯 丙酸 ；脱 卤酶 ；定 向进 化 ；分 子 对 接? 中图分 类号 ：????? 文献标志码 ：?? 文章 编号 ：????— ????????????一????— ??? ??????????????????????? ???????????????????? ????????????，????????，???????????，???????，???????????? ??????????????????????????????????????????????????????????????，??????????????????，???????????????，??????? ????????：???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????????，?????????????????????????????????????????????????????????????????．???????????? ???????????????????????， ?????????????????—?????????????—??， ???????????????．?％ ??????．?％