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- 2017-04-26 发布于广东
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习惯性流产的抗凝血酶原抗体IgG、IgM检测的初步应用的论文.doc
习惯性流产的抗凝血酶原抗体IgG、IgM检测的初步应用的论文
【摘要】 目的 建立人血浆抗凝血酶原抗体(apt)igg、igm 的间接elisa检测方法,并用于检测原因不明习惯性流产病人。方法 采用人凝血酶原包被微孔板,以碱性磷酸酶标记的抗人igg、igm为检测抗体,对35例原因不明习惯性流产患者血浆中的抗凝血酶原抗体igg、igm、igg+igm进行检测,同时计算其阳性率和优势比(or,95%可信限)。结果 所建方法线性范围广,稳定性、特异性、重复性较好。原因不明习惯性流产患者血清中抗凝血酶原抗体igg、igm、igg+igm阳性率分别为14.3%、11.4%和20%,对照组分别为2.5%、2.5%和5%,p值分别为0.073、0.14及0.05。结论 该法是一种较好的抗凝血酶原抗体 igg、igm定量测定法。原因不明习惯性流产的apt较高于正常妇女,可以作为原因不明习惯性流产患者的辅助诊断指标之一。 【关键词】 抗凝血酶原抗体; 抗磷脂抗体; 流产
detection of antiprothrombin antibodies igg,igm in patients en entryexit inspection and quarantine bureau,international travel health care center,xiamen 361012 china;
2.quanzhou children’s hospital,quanzhou 362000,china
abstract:objective to establish an indirect solid phase elisa method for the detection of antiprothrombin (apt)igg and igm,and apply in patients ethods a indirect elisa using the purified human prothrombin for plate coating and akplabeled goat antihuman igg or igm as detection antibody levels in plasmas from 35 patients ethod had high precision and good linearity and sho,igg+igmapt ore frequently found in patients bin assay ,in patients .
key bin antibody; antiphospholipid antibody; abortion
抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,apa)是一族主要针对磷脂结合蛋白的异质性抗体。.抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid syndrome,aps),是一组与抗磷脂抗体有关的疾病,典型表现有血栓形成和习惯性流产(recurrent abortion)。近年研究表明,低亲和力的抗凝血酶原抗体(antiprothrombin,apt)与抗磷脂抗体综合征有关[1,2]。我们参考了国外有关文献,在国内首次建立了抗凝血酶原抗体igg、igm的elisa检测方法,并检测了部分原因不明习惯性流产病人。
1 资料和方法
1.1 主要试剂与仪器 人凝血酶原纯品和高抗原结合性微孔板maxisorp分别购自stago和nunc公司。牛血清白蛋白(bsa)购自roche公司。碱性磷酸酶标记的山羊抗人igg、igm购自sigma公司。底物pnpp(pnitrophenyl phosphate)为bbi公司产品。酶标仪model 2550为biorad公司产品。
1.2 样本及分组
1.2.1 原因不明习惯性流产组(habitual abortion,ha)病例均有2次以上的自然流产或死胎史,由妇产科医师对患者按诊疗常规进行体检,并进行一些相关的特殊检查,选择已排除了子宫畸形、内分泌异常、染色体异常等明确流产原因的患者,共35例,年龄26~38岁,中位年龄29岁。
1.2.2 对照组 选择门诊健康、非妊娠妇女体检者40例,无心、肺、肝、肾疾病,无明显妇科疾病,pt及aptt皆正常,年龄25~39岁,中位年龄28岁。
采集静脉血,用枸橼酸钠(109 mmol/l)抗凝(1∶9),于22°c,2 500 r/min,离心15 min,制备乏血小板血浆。
1.3 elisa定量测定血浆apt igg、igm 以pbs稀释的病人凝血酶原4°c过夜,包被微孔板(10 μg/ml,每孔100 μl)。缓冲液(0.1%t(每
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