川芎药材极性部分特征性指纹图谱研究的论文.docVIP

　　川芎药材极性部分特征性指纹图谱研究的论文 作者：彭红， 付建武， 周玉春， 黄丽芸 【摘要】 目的研究川芎药材极性部分高效液相色谱(hplc)指纹图谱测定方法。方法以阿魏酸为对照，采用eclipse xdb-c18(ods-2, 250 mm×4. 6 mm, 5 μm)色谱柱，流动相为甲醇-1%醋酸梯度洗脱，流速 1.0 ml/min，柱温25℃，检测波长298 nm。结果共确定10个共有峰，其中7号峰为阿魏酸峰，为该指纹图谱的参照峰。供试品溶液的指纹图谱与对照指纹图谱中的全部10个共有峰对应，且顺序一致。结论实验方法简单、准确，研究所得的川芎指纹图谱稳定性、重复性好 ，可作为川芎极性部分的特征性指纹图谱。 【关键词】 川芎; 指纹图谱; 高效液相色谱 　　abstract：objectiveto study the detection methods atogram for polar parts of chuanxiong rhizome.methodsm×4. 6mm, 5μm)atographic column.the mobile phase ethanol and 1% hac, the temprature l/min,and the .results there ple just as in the reference solution,ethod is simple and accurate e; fingerprint chromatogram; hplc 　　川芎为伞形科植物川芎ligusticum chuanxiong hort.的干燥根茎，用于血淤气滞所致的月经不调、痛经闭经，肝郁气滞而致血行不畅的胸胁疼痛，风寒湿痹 ，跌打肿痛,头痛，风湿疼痛[1]，近年来,临床常用于治疗冠心病、心绞痛，缺血性脑血管病等心血管疾病和妇科疾病。.根据国家药品监督管理局在2000年颁发《中药注射液指纹图谱研究的技术要求(暂行)》(国药管注[2000]348号)[2] ，本实验运用指纹图谱相似度评价软件，对川芎药材进行了指纹图谱研究和比较研究。现报道如下。 　　1 器材 　　agilent 1200 高效液相色谱仪(dad检测器， vm×4.6 mm, 5 μm)，流动相为甲醇-1%醋酸梯度洗脱(见表1)，流速1.0 ml/min，柱温 25℃，以阿魏酸为对照品，检测波长298 nm。表1 梯度洗脱 　　2.2 对照品溶液的制备选取川芎药材中的主要成分之一阿魏酸为参照物，加甲醇定容使成每毫升含阿魏酸44μg的溶液，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备精密称取川芎药材粉末2.0 g，置于具塞锥形瓶中，加体积分数为95%乙醇50 ml,放置过夜，超声提取20 min，过滤，挥干溶剂后加20 ml水溶解，再分别以20，20，10 ml醋酸乙酯萃取3次，合并萃取液，挥干，残渣加甲醇溶解并定容至10 ml容量瓶中，经0.45 μm微孔滤膜过滤,即得。 　　2.4 精密度实验取同一批样品，连续进样测定5次，计算相似度在0. 99以上，精密度良好。结果见图1。 　　2.5 重复性实验取同一批样品，制备供试品溶液5份，分别进样测定，计算相似度在0. 99以上，重复性良好。结果见图2。 　　2.6 稳定性实验取同一批样品，制备供试品溶液，分别在0, 4, 8, 16, 24 h进样测定，计算相似度在0.99以上，稳定性良好。见图3。 　　2.7 样品的测定精密吸取供试品溶液10 μl，注入液相色谱仪，测定。供试品色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，与对照指纹图谱比较，计算相似度，即得。 　　供试品色谱图与对照指纹图谱比较，相似度不得小于0.9。指纹图谱见图4。 　　本指纹图谱共确定10个共有峰，其中7号峰为阿魏酸峰，为本指纹图谱的参照峰。供试品溶液的色谱图具有对照指纹图谱中的全部10个共有峰，且顺序一致。各峰保留时间及相对峰面积见表2。表2 10个共有峰的保留时间及相对峰面积 　　按照正文方法共测定了5批样品，批号分别为01～05，色谱图导入指纹图谱相似度计算软件，以批号01的样品图为参照，时间窗0.2，对照谱生成方法为平均数，共选择了如图5的10个色谱峰进行自动匹配，并确定这10个峰为川芎药材的特征峰。生成对照谱的匹配数据见表3。表3 生成对照谱的匹配数据 　　3 讨论 　　通过测定，我们将川芎的指纹图谱评价标准定为 10个特征峰，其中7号峰为阿魏酸。 　　从这 10批样品的高效液相色谱指纹图谱中可以看到，不同产地、不同采集时间的川芎样品，以及云南产川芎样品的指纹图谱，与川芎对照药材相比较指纹图谱的相似度都在90% 以上，这说明所研究的川芎指纹图谱具有比较好的稳定性和重复性。在本文条件下，川芎的指纹图谱具有较好的特征性