分子印迹毛细管整体柱液相色谱法测定咖啡因.pdfVIP

第 32 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究报告 第 2 期 2004 年 2 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 148 ~ 152 分子印迹毛细管整体柱液相色谱法测定咖啡因 颜流水 王宗花 罗国安＊ 王义明 （清华大学化学系，北京 100084） 摘 要 建立了一种新型高选择性分离测定咖啡因的微柱液相色谱法。在该方法中，以咖啡因为模板分子， 经紫外光引发原位聚合制备了分子印迹毛细管整体柱。考察了柱制备过程中影响柱性能的主要因素，优化了 色谱分离条件。结果显示所制备的分子印迹整体柱对咖啡因具有高度选择性，咖啡因与其结构相似物的最高 分离度为 2. 57。将这一方法用于测定??茶饮料、百事可乐和复方药片中咖啡因含量，获得满意结果。 关键词 毛细管整体柱，分子印迹聚合物，咖啡因，微柱高效液相色谱 ! 引 言 咖啡因是一种嘌呤类生物碱，它能促进血液流通，扩张血管，并且有利尿、兴奋中枢神经等功能。 咖啡因的含量是可可类食品、饮料、茶叶以及许多药物中含有的一个重要品质指标。由于除含咖啡因成 分外，待分析对象中还含有其结构相似化合物或多种添加剂等成分。这些成分都可能影响咖啡因含量 的准确测定。因此，分析工作者一直期望建立一种简便、高选择性的测定方法。我国 GB / T16344-1996 中规定饮料中咖啡因含量的测定方法是紫外分光光谱法和高效液相色谱法。紫外分光光谱法需要繁琐 的氯仿萃取，常规的高效液相色谱法需要价格昂贵的填充色谱柱和消耗大量的流动相，污染环境。分 子印迹聚合物因其具有预定的选择性和良好的稳定性，已作为一类新型色谱柱填料、固相萃取剂和传 感膜材料［1 ~ 4］。然而，为了避免繁琐的填充过程和因填充不均匀引起的色谱峰展宽等问题，近年来免填 充的分子印迹整体柱及其与微分离方法（ 包括微柱液相色谱、毛细管电泳、毛细管电色谱和芯片分离 等）的结合已引起人们极大兴趣和关注［5 ~ 8］。目前的研究还大多集中在柱制备和分离可行性方面探索， 用于实际样品分离分析的研究还少见报道。本文在前期工作基础上用低温（ - 15C ）光引发在毛细管 内原位聚合制备高选择性咖啡因印迹毛细管整体柱，并将该毛细管色谱柱用于分离测定饮料及药片中 咖啡因，获得满意结果。 # 实验部分 #. ! 试剂 甲基丙烯酸（MAA）、甲基丙烯酸 !-三甲氧基硅烷丙基酯及咖啡因（Fluka 公司）；茶碱、可可碱以及 1，7-二甲基黄嘌呤（Sigma 公司）；三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯（TRIM，Aldrich 公司产品）；乙腈（色谱 纯）；甲苯（分析纯），经金属钠干燥后重蒸。其余试剂均为分析纯。Pepsi cola（北京百事可乐饮料有限 公司），康师傅绿茶（Green Tea Mr Kon，青岛顶益食品有限公司）均从市场购得。复方对乙酰氨基酚片 （APC）为北京小西天中西药品分装厂产品。 #. # 印迹柱制备 毛细管柱按文献［9］方法制得。将印迹分子咖啡因、偶氮二异丁腈（ AIBN）、甲基丙烯酸（ MAA）和 三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯（TRIM）溶于含 10% 异辛烷的甲苯溶液。将混合物置于冰浴中，氮气脱 气后，小心地将其注入紫外透明的熔硅毛细管（75 m i. d. ；Polymicro Technologies，Phoenix，AZ）内， 两端套紧塑料塞，-