固相萃取-高效液相色谱法测定烟草样品中10种多酚.pdfVIP

第 33 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究简报 第 3 期 2005 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 359 ~ 362 固相萃取-高效液相色谱法测定烟草样品中 10 种多酚 张 甜1 董学畅＊1 吴方评1 杨光宇2 乔永峰1 （1 云南民族大学化学与生物技术学院，昆明 650031） （2 云南烟草科学研究院，昆明 650106） 摘 要 研究了用固相萃取预分离，高效液相色谱法测定烟草样品中的 10 种植物多酚。烟草样品中的多酚 提取液用 固相萃取小柱预分离脱脂，以 （ ， ）色谱柱为 Sep-park-C18 Waters Nova-pak-C18 3. 9 mm X 150 mm 5 !m 固定相，0. 05 mol / L 磷酸二氢钾缓冲溶液和甲醇梯度洗脱为流动相，烟草中主要的植物多酚均达到基线分离； 用紫外二级管矩阵检测器检测，得出各组分在其最大吸收波长下的色谱图，根据该色谱图的峰面积定量，并用 紫外光谱图对烟草中主要多酚进行辅助定性。标准回收率为 94% ~ 105% ；RSD 为 1. 3% ~ 1. 5% 。用该方 法测定了烟草样品中的 10 种植物多酚，结果令人满意。 关键词 高效液相色谱，固相萃取，多酚，烟草 1 引 言 植物多酚是烟草中一类重要物质，其在烟草中的含量对烟草质量有重要影响；因而研究烟草及其制 品中的植物多酚具有重要意义［1，2］。烟草多酚的测定方法主要有分光光度法、气相色谱法和液相色谱 法等［3 ~ 6］。光度法准确性较差而且只能近似测定总量；气相色谱法需要复杂的衍生化；传统的液相色谱 法样品前处理时需用有机溶剂对样品进行脱脂处理，操作较麻烦，且会造成多酚损失。近年来固相萃取 技术已在分析化学中得到广泛应用［7 ~ 11］，实验研究了用 固相萃取小柱预分离脱脂， Waters Sep-park-C18 高效液相色谱分离测定烟草中主要成分多酚；并通过紫外光谱图对主要多酚作辅助定性。该方法可同 时测定烟草中的 10 种多酚，将其用于烟草样品分析，取得满意结果。 2 实验部分 2. 1 仪器和试剂 Allaince 高效液相色谱-质谱联用仪（美国 Waters 公司），包括 2690 分离系统（四元泵、柱温箱及自 动进样器）；996（pDA）紫外二极管矩阵检测器；Millennium32 色谱管理软件。甲醇为高效液相色谱专用 （Fluka 公司）；水为石英亚沸蒸馏水并用 Milli-@50（ 美国 Millipore 公司）超纯水仪处理，电阻率 ＞ · ； 为 级（ 公司）； 咖啡 奎尼酸、绿原酸、 咖啡 奎尼酸、咖啡酸、七 18 cm KH2 pO4 HpLC Fluka 5-!- -d- 4-!- -d- 叶亭、莨菪宁、莨菪葶、芸香苷、莰菲醇-3-芸香糖苷、槲皮素标样（分别购于 Fluka 公司和 Sigma 公司，含 量 95% ）。 2. 2 色谱条件 色谱柱： 液