流动注射化学发光法测定大豆异黄酮.pdfVIP

第 34 卷 分析化学 FENXIHUAXUE) 研究简报 第 8 期 2006 年 8 月 CiineSeJournalofAnalyticalCiemiStry lll3 ~lll5 流动注射化学发光法测定犬亘异黄酮 杨 丹l 苍 晶l 郝再彬＊l 邱丽娟2 l 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨 l50030) 2 中国农科院作物品种资源研究所,北京 l0008l) 摘 要 基于在 NaOH碱性介质中,K3 Fe CN) 6 可以直接氧化大豆异黄酮产生强的化学发光这一现象,并结 -4 合流动注射分析技术,提出了直接化学发光测定大豆异黄酮含量的新方法O 当 K3 Fe CN) 6 浓度为 5.0 Xl0 mol/L,NaOH浓度为 0.5 mol/L,主副蠕动泵转数分别为 45 r/min 和 35 r/min 时,体系具有最强的化学发光O 该方法测定大豆异黄酮的线性范围为 l.0 Xl0 -3 ~0.5 g/L;其回归方程为 A 峰面积) :l93305C mg/L) + 229.97,r:0.9962;检出限为 4.6 Xl0 -4 g/LO 对 5.0 Xl0 -3 g/L大豆异黄酮溶液连续测定,每次得 3 个峰值, 重复 7 次,相对标准偏差为 2.46%O 本方法已用于大豆中异黄酮含量的测定O 关键词 流动注射,化学发光,大豆异黄酮 1 引 言 大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的次生代谢产物,属于黄酮类化合物,主要以异黄酮糖昔和相应 的昔元形式存在 l,2] O 大豆异黄酮具有弱雌激素~抗氧化~抗溶血和抗真菌等活性,能有效地预防和抑 制白血病~骨质疏松~胃癌~乳腺癌和前列腺癌等多种疾病的发生 3,4] O 超声波具有强烈振动和空化效 应,可以加速有效成分的溶出,从而缩短提取时间,提高产物得率 5] O 在大豆异黄酮的乙醇提取液中, 色素~糖和醇溶性蛋白等杂质也一起被提取出来O 异黄酮与杂蛋白的紫外吸收峰较近,若用紫外分光光 度法测定大豆异黄酮的含量,背景吸收较大,杂质将严重干扰异黄酮的测定O 研究发现,在碱性介质中, K3 Fe CN) 6 可以直接氧化大豆异黄酮产生较强的化学发光,从而克服了杂质的影响O 因此,提出了一种 测定大豆异黄酮含量的流动注射化学发光法O 该方法具有操作简便,灵敏度高,线性范围宽,成本低,且 具有测定大批量的异黄酮等优点,已成功地用于大豆中异黄酮的测定O 2 实验部分 2.1 材料~试剂和仪器 测定用大豆样品 化学诱变东农 42 大豆品种, 在其后代中筛选出来遗传稳定的第 5 代品系 HK808 6] );大豆异黄酮标准品 为日本和光纯药工业株式会社)O 其余试剂均为国产分析纯O KO5200B型超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司);LS45 荧光光度计 美国 Perkin Eimer公 司);MPI-B型多参数化学发光分析测试系统 西安瑞迈电子有限公司)O 2.2 实验方法 化学发光分析仪的主蠕动泵分别将载流 H2 O和 K3 Fe CN) 6 溶液以 45r/min 的流速通过相应的管 道进行三通混合,输入分析系统O