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二章节菌种扩大和培养
2. 生物工业菌种与种子扩大培养;本节思考题;2. 3工业微生物菌种的选育; 自然选育是一种简单易行的选育方法,它可以达到纯化菌种,防止菌种衰退、稳定生产、提高产量的目的。但是自然选育的最大缺点是效率低、进展慢。因此,经常把自然选育和诱变育种交替使用,这样可以收到良好的效果。
自然选育(自然分离)的一般程序,是把菌种制备成单孢子悬浮液,经过适当的稀释以后,在固体平板上进行分离,挑取部分单菌落进行生产能力的测定,经反复筛选,以确定生产能力更高的菌株代替原来的菌株。
;;前述介绍放线菌纲为主的分离方法原理和发展:;小结:菌种的分离简介 ;二、分离思路 ;定方案:首先要查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。
采样:有针对性地采集样品。
增殖:人为地通过控制养分或培养条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势???
分离:利用分离技术得到纯种。
发酵性能测定:进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。;菌种筛选主要步骤;原种斜面 ↓确定发酵培养基础条件 筛选 ↓ 初筛(1株1瓶) ↓ 复筛(1株3~5瓶) ↓结合初步工艺条件摸索 再复筛(1株3~5瓶) ↓ 3~5株 ↓单株纯种分离 ↓ 生产性能试验 ↓→毒性试验菌种鉴定; (一)采样;;2、采样季节:以温度适中,雨量不多的秋初为好。
3、采土方式:在选好适当地点后,用小铲子除去表土,取离地面5-15cm处的土约10g,盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中,扎好,标记,记录采样时间、地点、环境条件等,以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化,宜将样品逐步分批寄回,以便及时分离。;(二)增殖培养;(三)培养分离;平皿划线分离法
a. 连续划线分离法 b. 分区划线分离法;(四)筛 选;(五)毒性试验;
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