中心实验室实验指南.PDF

中心实验室实验指南 自动切胶仪 作者：郭丹 修订日期：2014-9-18 【目的及应用】： Ettan 点样仪可以将肽段样品和基质转移到靶板的表面，从而进行后续的质谱分析和鉴定。 该仪器主要适用于那些存放于 96 孔板中的肽段样品分析。即可以在使用点样仪中的自动模式， 最多可处理 384 个样品；使用手动模式，最多可以处理 96 个样品。Ettan 靶板可容纳的样品和 标准总数量为 576，VoyangerTM 和 BrukerTM 分别为 400 和 768。 【试剂及设备】： 1. 设备及配件：Ettan Spot Picker 自动切胶仪 (1) 96 孔微孔板（已编码的聚丙烯材质微孔板，V 型底，编号 18-1150-42） (2) Ettan MALDI-TOF MS 点样靶板试剂盒：编号：18-1147-18 (3)带帽小瓶（100 个/包），编号 18-1152-75 2.试剂 2.1 系统溶液 50%乙腈/0.5%TFA 的缓冲液，经过排气和 0.2 微米滤膜过滤处理，存放于 Milli-Q 水洗过 编号：PUMCHCL-P-3-Q08-1 北京协和医院中心实验室 更新日期：2014/09/18 第 1 页 ,共 6 页 中心实验室实验指南 的干净玻璃瓶中。点样仪所使用的工作液既可以用于样品的溶解，又用于探针的清洗。工作液 中的污染物可能导致样品分析时非特异性的噪音信号的产生。推荐的工作液最小体积为 500ml。 2.2 基质溶液 (1) 饱和的 α-氰基-4-羟基-肉桂酸(α-cyano-4-hydroxy cinnamic acid, HCCA) 溶于 50%乙腈 /0.5%TFA 溶液中； (2) 饱和的 2,-二羟基苯甲酸( 2,5-Dihydroxybenzoic acid, DHB) 溶于 50%乙腈/0.1 %TFA 溶液中。 2.3 用于内部/外部校准的标准肽溶液 肽段名称 单同位素质量(+H) 工作液浓度 检测浓度 溶剂 (ILE7)-Angiotensin III 897.53 20 pmol/μl 3 pmol/μl 50%乙腈 hACTH(18–39) 2465.19 20 pmol/μl 3 pmol/μl 0.5%TFA 【实验步骤】： 1. 开机及系统设置 1.1 系统设置 编号：PUMCHCL-P-3-Q08-1 北京协和医院中心实验室 更新日期：2014/09/18 第 2 页 ,共 6 页