光核桃叶片DNA提取条件的优化.PDF

第 30 卷 第 3 期 经 济 林 研 究 Vol. 30 No.3 2012 年 9 月 Nonwood Forest Research Sep. 2012 光核桃叶片 DNA 提取条件的优化 李 静 1，李荣钦 2，王 超 2，孟凡娟 1 （1. 东北林业大学 生命科学学院，黑龙江 哈尔滨 150040；2. 西藏农牧学院，西藏 林芝 860000） 摘 要：光核桃是我国特有的蔷薇科桃属植物，具有较强的耐旱、抗病能力和更新容易等特性。提取高质量的 基因组 DNA 是研究光核桃的分子特性的关键所在。为了获得高质量的光核桃基因组 DNA，利用 CTAB 提取法 对其提取方法进行了优化。结果表明： CTAB 提取液的最佳用量为 700 μL，最佳裂解时间为 40 min，酚、氯仿、 异戊醇混合液（体积比为 25 ∶ 24 ∶ 1）的最佳使用次数是 2 次，氯仿、异戊醇混合液（体积比为 24 ∶ 1）的 最佳使用次数也是 2 次，异丙醇的最佳使用体积分数为 2/3。 关键词：光核桃；基因组 DNA；提取；优化 中图分类号：S662.1 文献标志码：A 文章编号：1003—8981(2012)03—0080—04 Optimizing on extraction conditions of DNA in Amygdalus mira leaves LI Jing1, LI Rong-qin2, WANG Chao2, MENG Fan-juan1 (1. College of Life Science, Northeast Forestry University, Harbin 150040, Heilongjiang, China; 2. Tibet Agricultural and Animal Husbandry College, Linzhi 860000, Tibet, China) Abstract: Amygdalus mira belongs to Rosaceae and Amygdabus from China, and has strong drought tolerance, disease- resistant, easy to update, and other characteristics. The key to researching molecular properties in A. mira is to get high- quality genomic DNA. In order for reaching the goal, the CTAB extraction method was optimized. The results show that the best dosage of CTAB extracts is 700 μL, the best incubation time is 40 min, the best usage frequency of the mixture of phenol, chloroform and isoamyl alcohol (25