分离工程第七章讲义.pptVIP

第七章 色谱 ;第一节 色谱学基础 ;概念与原理;1 色谱一般过程;2 色谱分类 ;2 色谱分类;5)、按原理分类;2 色谱分类;3 色谱的名词术语;3 色谱的名词术语;3 色谱的名词术语;3 色谱的名词术语;3 色谱的名词术语;3 色谱的名词术语;4 色谱理论 ;4.1 塔板理论 ;4.1 塔板理论;4.2 速率理论 ;4.3 色谱分离度 ;4.3 色谱分离度;4.3 色谱分离度;4.4 定性分析 ;4.4 定性分析 ;4.5 定量分析 ;4.4 定性和定量分析 ;4.4 定性和定量分析 ;4.6 定量方法 ;4.6 定量方法 ;4.6 定量方法： ;5 应用: 违禁药物分析 ; 2、按层析的分离机理分类 （1）排阻层析(exclusion chromatography) 利用凝胶层析介质(固定相)交联度的不同所形成的网状孔径的大小，在层析时能阻止比网孔直径大的生物大分子通过。利用流动相中溶质的分子量大小差异而进行分离的一种方法，称之为排阻层析。 ;（2）离子交换层析(ion exchange chromatography) 利用固定相球形介质表面活性基团经化学键合方法，将具有交换能力的离子基团在固定相上面，这些离子基团可以与流动相中离子发生可逆性离子交换反应而进行分离的方法，称之为离子交换层析。;（3）吸附层析(absorption chromatography) 利用吸附层析介质表面的活性分子或活性基团，对流动相中不同溶质产生吸附作用，利用其对不同溶质吸附能力的强弱而进行分离的一种方法，称之为吸附层析。 ;（4）分配层析(partition chromatography);（5）亲和层析(affinity chromatography) 在固定相载体表面偶联具有特殊亲和作用的配基，这些配基可以与流动相中溶质分子发生可逆的特异性结合而进行分离的一种方法，称之为亲和层析。; （6）金属螯合层析(metal chelating chromatography) 利用固定相载体上偶联的亚胺基乙二酸为配基与二价金属离子发生螯合作用，结合在固定相上，二价金属离子可以与流动相中含有的半胱氨酸、组氨酸、咪唑及其类似物发生特异螯合作用而进行分离的方法，称之为金属螯合层析。 ;（7）疏水层析(hydrophobic chromatography);（8）反向层析(reverse phase chromatography) 利用固定相载体上偶联的疏水性较强的配基，在一定非极性的溶剂中能够与溶剂中的疏水分子发生作用，以非极性配基为固定相，极性溶剂为流动相来分离不同极性的物质的方法，称之为反相层析。 （9）聚焦层析(focusing chromatography) 利用固定相载体上偶联的载体两性电解质分子，在层析过程中所形成的pH梯度，并与流动相中不同等电点的分子发生聚焦反应进行分离的方法，称之为聚焦层析。 ;（10）灌注层析(perfusion chromatography) 利用刚性较强的层析介质颗粒中具有的不同大小贯穿孔与流动相中溶质分子分子量的差异进行分离的方法，称之为灌注层析。 ;