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柠檬酸三钠用途和合成方法-Solarbio.PDF
Beijing Solarbio Science Technology Co., Ltd
Tel: 010 Solarbio Fax: 01082
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柠檬酸钠抗原修复液(50×)说明书
货号:C1032
规格:100ml/500ml
保存:室温密封保存,有效期 12 个月。
产品说明:
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部
分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假
阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的
交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。
柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval solution,50×)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、
冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋
白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的
免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗
原修复。
按照每个片子需要 10ml 抗原修复液(1×)计算,100ml 抗原修复液(50×)可以用于 500 个样本的抗原修复。
使用方法:
本产品是 50×的浓缩液,使用之前按需要量用去离子水或双蒸水稀释至 1×。
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 无水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1
次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸馏水洗 2 次,每次 3-5min。
b. 抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min
内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加
热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。
随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续
的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 min。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可
以控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预
热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸
和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后
即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注??事项:
抗原修复过程可以使用索莱宝的的抗原修复盒进行操作。
为了您的安全
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