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束缚应激对小鼠全血铁锌钙镁含量影响的论文.doc
束缚应激对小鼠全血铁锌钙镁含量影响的论文
束缚应激对小鼠全血铁锌钙镁含量影响
【关键词】 应激
【摘要】 目的 观察束缚应激后小鼠全血中铁、锌、钙和镁含量的变化,研究束缚应激对全血4种元素的影响和规律。方法 建立小鼠束缚应激模型,原子吸收分光光度法测定小鼠全血中铁、锌、钙和镁的含量。结果 对照组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量分别为(39120±1601),(590±056),(5944±1071),(4512±338)μg/ml;实验组小鼠全血铁、锌、钙、镁含量分别为(35123±3522),(505±070),(5968±740),(4399±431)μg/ml。与对照组比较,接受应激的小鼠全血中铁、锌含量显著降低(p<005),钙含量略有升高,镁含量降低,但差异均无统计学意义(p>005)。结论 束缚应激可使小鼠全血铁、锌含量显著降低;微量元素铁、锌与束缚应激反应之间存在一定的联系。 【关键词】 应激
应激是机体对各种外界应激原作用的反应,适度的应激是机体保护机制的一部分,有益于健康。但过度的应激往往成为疾病的诱因〔1〕。研究证实,应激能够影响动物和人体的免疫功能〔2,3〕。机体免疫系统功能的紊乱又是感染性疾病、肿瘤等发生或恶化的直接原因〔4,5〕。.实验研究表明,应激可引起机体细胞因子、蛋白、酶等的变化〔6,7〕,而有关应激与元素之间关系的研究较少。铁、锌、钙和镁是人体中的必需元素,在人体生理生化过程中起着重要作用。因此,研究应激与元素之间的关系有重要意义。原子吸收光谱法具有灵敏度高、选择性好、精密度高、分析速度快等优点。本文采用原子吸收光谱法测定了束缚应激后小鼠全血中铁、锌、钙和镁4种元素的含量,旨在探讨束缚应激对全血中元素的影响。
1 材料与方法
11 动物与分组 选用32只健康c57bl/6纯系小鼠,体重20~25g,雌雄兼用,随机分为对照组和束缚组,每组16只。
12 应激模型的制备 应激模型的制备按文献[8]进行。将小鼠装入带有通气孔的可以限制其各个方向的束缚器中,室温下维持12h。正常对照组小鼠留置原饲养笼中正常饲养。实验期间2组小鼠均禁食禁水。
13 标本采集 解除束缚后恢复2h,摘除眼球采血,肝素抗凝。
14 全血元素含量测定
141 样品处理 取肝素抗凝血05ml用去离子水稀释定容,测定铁、钙、镁稀释100倍,锌稀释30倍。
142 标准溶液的配制 铁、钙、锌的工作液(100μg/ml)及镁的工作液(50μg/ml)分别由1mg/ml的铁、镁、钙、锌储备液稀释而成。用工作液稀释成不同浓度的标准溶液。标准溶液系列:铁标准溶液为10,20,30,40,60μg/ml;钙标准溶液为01,02,04,08,12μg/ml;锌标准溶液为005,01,02,03,04μg/ml;镁标准溶液为005,01,02,03,04μg/ml。
143 元素测定 用aa370mc原子吸收分光光度计测定样品中4种元素的含量,优化后的仪器工作条件为空气流量:7l/min;乙炔流量:17l/min;灯电流:铁和锌为6ma,钙和镁为4ma;狭缝宽度:铁为02mm,锌、钙和镁为07mm;波长:铁为2483nm,锌为2139nm,钙为4227nm,镁为2852nm。对标准溶液进行测定,绘制标准曲线,各元素线性关系良好。各元素回归方程为铁:c=1383a-04848;锌:c=5815a-002241;钙:c=1613a+001452;镁:c=1038a-002035。相关系数铁:09942;锌:09979;钙:09994;镁:09996。
15 统计分析 应用spss 100 统计软件进行分析,测得数据经spssexplore去除奇异值后得到有效数据(即分组时各组均为16只,去奇异值后有的少于16只)采用独立样本t检验分析2组差异,检验水平为p<005。
2 结果
21 小鼠全血铁含量测定 应激后16只小鼠全血中铁含量为(35123±3522)μg/ml,与对照组〔15只小鼠结果为(39120±1601)μg/ml〕比较,显著降低,差异有统计学意义(p<005)。
22 小鼠全血锌含量测定 应激后16只小鼠全血中锌含量为(505±070)μg/ml,与对照组〔15只小鼠结果为(590±056)μg/ml〕比较,显著降低,差异有统计学意义(p<005)。
23 小鼠全血钙含量测定 应激后16只小鼠全血中钙含量为(5968±740)μg/ml,与对照组〔16只小鼠结果为(5944±107)μg/ml〕比较,
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