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氨基酸复习
噬菌体效价:一毫升培养液中所含活噬菌体的数量。第一个宿主细胞裂解后所产生的子代噬菌体量称裂解量。感染复数:是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染 HYPERLINK /view/43444.htm \t _blank 噬菌体的数量。氨基酸发酵的特点:1代谢控制发酵(又称新型发酵) 这一类属于在DNA分子水平上,通过遗传学或其它生物化学的手段,人为地改变、控制微生物代谢,使有用产物大量生成、积累的发酵。2氨基酸发酵为好气性发酵,为好氧微生物,需通风搅拌,无菌空气制备。3菌种:细菌①个体小,繁殖速度快,短时间内得大量产物。②细胞结构简单,是微生物行业的先锋。③易受噬菌体的浸染,造成的危害严重,故无菌操作要求严格。解除氨基酸代谢控制的方法:①降低末端产物,营养缺陷型菌株。②从遗传上改变调节酶的结构(指调节酶类的调节亚基结构的改变,生成不受末端产物抑制和阻遏的酶,从而解除反馈控制,大量积累末端产物),抗结构类似物突变菌株。③细胞膜透性调节。淀粉水解糖制备方法:酸法、酶法、酸梅法。淀粉水解糖生产的意义:氨基酸生产菌不能直接利用淀粉,也基本不能利用糊精作为碳源。以淀粉为原料时,需经过糖化,将淀粉水解成葡萄糖,得到水解葡萄糖液,才能供发酵使用。淀粉水解糖液的质量要求:糖液透光率>90%(420nm)。不含糊精、蛋白质(起泡物质)。转化率>90%。DE值90%以上,还原糖浓度>16%。糖液不能变质。DE值:葡萄糖值,指葡萄糖值占干物质的百分率。酸法水解制糖的原理:利用无机酸为催化剂,在高温高压下将淀粉水解转化为葡萄糖。酸法水解包括三种反应:水解反应。复合反应。分解反应酸法优点:工艺简单、水解时间短、生产效率高、设备周转快。酶法优点:1酶有较高专一性,水解副产物少,水解纯度高,DE值可达98%以上。2酶解反应条件温和,不需要耐高温高压耐腐蚀的设备。3可在较高的淀粉浓度下水解,水解糖液的淀粉量可达30%以上4酶法可以用粗原料,可简化培养基,少加甚至不加生物素,有利于发酵稳定,提高糖酸转化率,也有利于后道提取。5制得的糖液质量高6酶法同样适于大米或粗淀粉原料,避免加工过程中淀粉大量流失。缺点:反应时间长,夏天糖液易变质。要求设备较多,需要具备专门培养酶的条件。影响糖质量的因素:1淀粉乳的浓度,合理控制,一般12-13Beo。② 酸的种类和浓度H2C2O4> H2SO4> HCl 。一般选用HCl,浓度0.6-0.8g/g干淀粉,pH1.2-1.7。③ 作用温度与时间,温度高,时间短,糖液质量好。温度高,时间长,糖液质量差。一般0.28-0.3 mPa,15-20 min。④ 糖化设备与糖化操作: 密闭糖化罐,D:H为1:1.15-2.5,耐腐蚀。为保证糖化均匀,罐体不能太大,一般不超过6 m3。 ⑤糖化终点控制。糊化:α—淀粉酶能够水解淀粉分子内部的α-1,4糖苷键,生成糊精和低聚糖。随着淀粉苷键的断裂,分子量越来越小,反应粘度不断下降,流动性增强,这种现象工业生产称液化,因为水解主要产物是糊精,也称糊化。熟淀粉:又称糊化淀粉,虽溶于水,但容易回生。熟淀粉也叫氧化淀粉,是淀粉与高碘酸钠化合物。熟淀粉经过了糊化,加热或用氢氧化钠糊化处理,其机理是淀粉内羟基间氢键被破坏。糖质原料谷氨酸产生菌的特点:①形态为球形,棒形已至短杆形②G+③无芽孢④无鞭毛⑤需氧微生物⑥生物素为生长因子⑦脲酶活性强⑧不能利用淀粉⑨谷氨酸脱氢酶活性强大,α-酮戊二酸脱氢酶活性弱。菌种为什么要分离纯化?产生了退化。退化的原因:基因突变 1.营养缺陷型菌株发生回复突变,成为野生型 2.非营养缺陷型菌株发生自发突变成为负突变的菌株,自发突变率10-8;诱变菌种会产生恢复突变。分离现象 遗传育种获得的菌种若是多核或单核,但DNA双链之一发生突变,随着传代,其生产性状也发生退化酶制剂:专一性、高效性、具有蛋白质的特性、作用条件温和、酶活性可以受到微量元素存在的抑制或促进的影响。糖化条件:温度60度、时间20h、糖化酶用量100单位/g/干淀粉、pH4.5左右分离纯化步骤:平板稀释或划线分离,分离单菌落;对分离的单菌落斜面进行小型发酵实验,筛选高产菌株。分离纯化的意义:保证稳产高产的措施。进行生产育种,自然育种。1得到单一菌种,2.纯化后的单一的 HYPERLINK /search?word=%E8%8F%8C%E8%90%BDfr=qb_search_expie=utf8 \t _blank 菌落便于保存,防止发生菌种异化等3.可以对纯化后的单一菌种进行进一步的利用,例如提取产物等种子的质量要求:1原料廉价、生长迅速、目的产物产量高。2易于控制、酶活性高、发酵周期较短。3抗杂菌和噬菌体能力强。4菌种遗传性能稳定,不易变异和退化。5不产生任何有害的生物活性物质和毒
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