转化研究生实验课课件.pptVIP

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2017-04-30 发布于湖北
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转化研究生实验课课件.ppt

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转化研究生实验课课件

一. 感受态的制备和转化;实验步骤;? 7.加入10μl DNA，冰浴30min； ? 8. 42℃热激2min； ? 9. 迅速冰浴2min； ? 10. 加入0.8ml LB(Amp-)，37℃ 250rpm摇育1h； ? 11.取40μl X-gal和4μl IPTG涂布平板，等吸收干后，取100μl菌液涂布平板(Amp+)，37℃培养过夜。 ;(α片段）;;二. 胶回收;? 1. 每管加入SolutionⅠ350μl，65℃水浴10min； ? 2. 移入吸附柱，12,000g离心1min； ? 3. 弃废液，加入500μl SolutionⅡ，12,000g离心1min； ? 4. 重复步骤3一次； ? 5. 弃废液，空柱离心1次，12,000g，2min； ? 6. 吸附柱移入一新的EP管中，加入20μl65℃预热的ddH2O洗脱，12,000g离心1min； ? 7. 加入4μl 6×loading buffer电泳观察。