主要用途-名称.doc

PAGE  PAGE 5 GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS10110.3 v.A GENMED植物脂质比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 GENMED植物脂质比色法定量检测试剂是一种旨在通过脂溶性偶氮染料油红O特异性地使植物组织细胞内中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白显示红色或深红色，在分光光度仪上进行比色分析，而获得植物样本脂质定量信息的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等样本。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，着色清晰。 技术背景 脂类物质（LIPIDS）是一类脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇类（STEROL）物质，例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用，是膜结构的组成成分和细胞信号分子。油红O（OIL RED O），又称为27号红色溶剂（SOLVENT RED 27）、苏丹红5B（SUDAN RED 5B），是优于氢醇染料溶剂（HYDROALCOHOLIC DYE SOLVENT）的脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME DIAZO DYE）。其分子式为C26H24N4O，分子量为408.51。染色显示组织细胞脂类物质呈红色或深红色。在分光光度仪或酶标仪上（520nm波长）可以进行定量分析脂质含量。 产品内容 GENMED清理液（Reagent A） 60毫升 GENMED裂解液（Reagent B） 100毫升 GENMED染色液（Reagent C） 20毫升 GENMED溶解液（Reagent D） 20毫升 产品说明书 1份 保存方式 保存GENMED染色液（Reagent C）在4℃冰箱里，其余的保存在室温下；试剂具有挥发性，确保瓶盖密闭；GENMED染色液（Reagent C），避免光照；有效保证6月 用户自备 15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器 1.5毫升离心管：用于样品处理的容器 DOUNCE匀浆器：用于裂解植物组织 微型台式离心机：用于样品操作 比色皿：用于比色分析的容器 分光光度仪：用于定量检测植物细胞脂质含量情况 实验步骤 样品准备 准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量 （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管 （选择步骤）加入3毫升GENMED清理液（Reagent A）清洗1次 即刻用刀片切碎组织 放进一个预冷的15毫升锥形离心管 加入预冷的1毫升GENMED裂解液（Reagent B） 涡旋震荡5秒，充分混匀 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约80下） 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管 移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－GMS30030.1） 放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用 测定准备 准备好待测样品，置于冰槽里备用 设定好分光光度仪：520nm波长，并置零 背景对照 移取100微升GENMED裂解液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管 加入900微升GENMED染色液（Reagent C） 室温下孵育15分钟，避免光照 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g 小心抽去上清液 加入1毫升GENMED裂解液（Reagent B） 轻度涡旋震荡 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g 小心抽去上清液 重复实验步骤6至9二次 加入1毫升GENMED溶解液（Reagent D） 轻度涡旋震荡，混匀 室温下孵育30分钟，避免光照 转移到比色皿 即刻放进分光光度仪（520 nm波长）：获得背景对照吸光读数（OD） 样品测读 移取100微升上述制备的待测样品到新的1.5毫升离心管 加入900微升GENMED染色液（Reagent C） 室温下孵育15分钟，避免光照 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g 小心抽去上清液 加入1毫升GENMED裂解液（Reagent B） 轻度涡旋震荡，混匀颗粒群 放进微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g 小心抽去上清液 重复实验步骤6至9二次 加入1毫升GENMED溶解液（Reagent D） 轻度涡旋震荡，混匀颗粒群 室温下孵育30分钟，避免光照 转移到比色皿 即刻放进分光光度仪（520 nm波长）：获得待测样品吸光读数（OD） 实际