第二十一章高效液相色谱法.ppt

第18章 高效液相色谱法;高效液相色谱仪示意图;第一节 HPLC的主要类型和原理; 二、化学键合相色谱法（BPC）  （bonded phase chromatography）; 二、化学键合相色谱法（BPC）  （bonded phase chromatography）;固定相：氰基与氨基化学键合相 分别将氰乙硅烷基 [-Si(CH2)2CN]、 氨丙硅烷基 [-Si(CH2)2NH2]键合在硅胶上而制成 流动相：烷烃（正己烷）加适量极性调整剂;正相键合相色谱主要用于分离极性至中等极性的分子型化合物 分离的一般规律： ;（二）反相键合相色谱法 ;（二）反相键合相色谱法 ;（三）反相离子对色谱法 paired ion chromatography （PIC IPC）; ; PIC：把离子对试剂加入极性流动相中，被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂的反离子生成不荷电的中性离子对，从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度，使分配系数增加，改善分离效果。;三、离子抑制色谱法 ion suppression chromatography （ISC）;在分离阿司匹林和去甲麻黄碱时选用的固定相是C18柱，流动相为甲醇/水=50:50系统，加入正己烷磺酸，调节pH约3.5；而4-氨基苯甲酸的分析同样采用C18柱，但是流动相却用四丁基氢氧化铵加入甲醇/水=50:50系统中，pH约7.5。 ;二、化学键合相色谱法的流动相（p354）;经试验获得试样在不同HPLC色谱条件下的色谱图如下（a-c） ;三、分离条件的选择（p357）;1. 涡流扩散项A;2. 纵向扩散项 B / u;3. 传质阻抗项 Cu;（1）固定相传质阻抗;H=A+Cu;三、分离条件的选择（p358）; ; ; ; ;一市售镇痛药片的包装上标明含有325mg阿司匹林和50mg的咖啡因。现取2片与0.0773g非那西丁，加入10ml乙醇，振摇10分钟，然后加入10ml0.5mol/L的甲酸铵最后稀释定容至100ml。药片中含有不溶性辅料，因此先过滤，然后取1μl滤液注入HPLC仪，记录色谱图结果如下：已知阿司匹林和咖啡因相对于非那西丁的校正因子分别为9.014和4.609。 ; ; 1 在高效液相色谱中，下述哪种操作，不能改变色谱柱的选择性？（ ） A 改变固定相的种类 B 改变流动相的种类 C 改变填料的粒度和柱长 D 改变流动相的配比; ; ;酸碱滴定法—间接滴定法