高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷的含量的论文 作者：钱平,贾云,刘志辉,钱芳 【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定郁李仁中苦杏仁苷含量的方法。方法 色谱柱：supelco ods c18(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(20∶80)；柱温：25 ℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：210 nm。结果 苦杏仁苷峰分离良好,苦杏仁苷浓度在0.066 13～4.232 μg间线性关系良好,r＝1.000 0,平均回收率为95.91%(rsd＝2.29%)。结论 本方法准确、可靠,可用于郁李仁中苦杏仁苷的含量测定。 【关键词】 郁李仁；苦杏仁苷；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to establish a hplc method for the determination of amygdalin in semen pruni. methods the analytical column n (4.6 mm×250 mm, 5 μm), ethanol-obile phase. the flol/min, and the detection . results the linear range for amygdalin ethod is accurate and reliable, and can be used in the determination of amygdalin in semen pruni. key en pruni；amygdalin；hplc；content determination 郁李仁为蔷薇科植物欧李prunus humilis bge.、郁李 prunus japonica thunb.或长柄扁桃prunus pedunculata maxim.的干燥成熟种子,前二者习称“小李仁”,后者习称“大李仁”,具有润燥滑肠、下气、利水的功效[1]。.苦杏仁苷为郁李仁的主要成分之一,2005年版《中华人民共和国药典》在该药材含量测定项下采用银量法测定,但银量法属于间接测定方法,影响因素多,而目前采用其他方法对郁李仁进行含量测定的报道较少。笔者采用高效液相色谱(hplc)法直接测定郁李仁中苦杏仁苷的含量,方法准确、可靠,为郁李仁中苦杏仁苷的含量测定提供了依据和参考。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　pom×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(20∶80)；柱温：25 ℃；流速：1.0 ml/min；检测波长：210 nm,进样量：20 μl。色谱图见图1。 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥12 h的苦杏仁苷对照品42.32 mg,置10 ml量瓶中,用70%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得苦杏仁苷4.232 mg/ml的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取郁李仁粗粉0.3 g,精密称定,置具塞三角烧瓶中,加石油醚(60～90 ℃)50 ml,回流提取1 h,过滤,以石油醚分3次洗涤滤渣及容器,每次10 ml,弃去石油醚液,滤纸及滤渣挥干溶剂,置原容器中,精密加入70%甲醇溶液50 ml,精密称定,回流提取1 h,放冷至室温,再称重,用70%甲醇补足失重,抽滤,精密量取续滤液5 ml置10 ml量瓶中,以70%甲醇稀释至刻度,以0.45 μm滤膜滤过,取续滤液即得。 　　2.4 线性关系考察 精密量取苦杏仁苷对照品溶液1 ml置10 ml量瓶中,用70%甲醇稀释至刻度,再依次稀释,制得含苦杏仁苷211.6、105.8、52.9、26.45、13.225、6.612 5、3.306 25 μg/ml的对照品溶液。分别精密吸取各20 μl进样测定,以峰面积积分值对浓度进行回归分析,得苦杏仁苷回归方程为：y＝22 645x＋10 860,r＝1.000 0；苦杏仁苷线性范围为0.066 13～4.232 μg。 　　2.5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液重复进样6次,测得苦杏仁苷峰面积积分值的rsd＝0.86%。 　　2.6 重复性试验 取同一批次样品6份,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,按照“2.1”项下色谱条件测定,结果苦杏仁苷的平均含量为3.16%,rsd＝1.35%。 　　2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液于配制后0、2、4、6、8、10、24 h测定,计算峰面积rsd＝1.11%,表明供试品溶液在24 h内稳定。 　　2.8 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批次(批号080121)郁李仁粉末6份,每份约0.15 g,脱脂后分别精密加入4.232 mg/ml的苦杏仁苷对照品溶液1 ml,依法制备供试品溶液并测定。结果见表1。表1 加样回收率试