人参总皂苷对PDGF_BB所致血管平滑肌细胞增殖周期的影响.pdfVIP

人参总皂苷对 PDGF-BB所致血管平滑肌细胞增殖周期的影响 黄 警,黄燮南,张 纾, 杨丹莉,吴 芹,邓 江, 高 杨 (遵义医学院药理学教研室暨贵州省基础药理重点实验室, 贵州 遵义 563003) 收稿日期: 2010- 01- 21,修回日期: 2010- 03- 17 基金项目: 贵州省优秀科技教育人才省长基金项目 1N o. 黔省合字 ( 2007 ) 53号2 作者简介:黄 警 ( 1983- ) , 男, 硕士生, E-m ai:l h j2007039@ 163. com; 黄燮南 ( 1943- ) , 男, 教授, 研究方向: 心血管药理学, T e:l 0852-8609670,通讯作者, E-ma i:l huangx ien an@ yahoo. com. cn 中国图书分类号: R-332; R 284. 1; R 322. 74; R 329. 24; R 329. 28; R 543. 502. 2 文献标识码: A 文章编号: 1001- 1978( 2010) 06- 0787- 05 摘要: 目的 研究人参总皂苷 ( tote l g insenos ides, TG )对血小 板源性生长因子 BB型 ( PDGF-BB)所致血管平滑肌细胞 ( VSMC)增殖周期的影响并探讨其可能的机制。方法 组 织块贴壁法培养 SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞, MTT比色法 观察 TG ( 10、30、100 m g# L- 1 )对 PDGF-BB ( 25 Lg# L - 1 )所 致的 VSMC增殖的影响;流式细胞仪分析细胞增殖周期; R e- a-l tim e RT-PCR检测 VSMC中内皮型一氧化氮合酶 ( eNOS)、 周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制因子 P27 ( KIP1)、原癌基因 c- fos、周期蛋白 D1 ( CyclinD1) mRNA的表达。结果 在正常 细胞中加入 TG 100 m g# L- 1不影响细胞的吸光度值及 G0 / G1期、G2 /M期、S期细胞比例 (P 0105); PDGF-BB可明显 升高吸光度值 (P 01 01), 增加 S期细胞比例而降低 G0 /G1 期细胞比例 (P 0101), 并明显增加 c- fos、Cyc linD1 mRNA 的表达, 下调 eNOS和 P27(K IP1)的表达 (P 0101 )。TG低、 中、高浓度均明显抑制 PDGF-BB诱导的吸光度值升高 (P 01 01), 降低 S期细胞比例而升高 G0 /G 1期细胞比例, 明显下 调 PDGF-BB所致的 c- fos及 Cyc linD1 mRNA高表达 (P 01 01), 并使 eNOS mRNA表达升高 (P 01 05), 但对 P27( KIP1) 的表达无明显影响 (P 0105)。结论 TG通过阻止 VSMC 由 G0 /G1期进入 S期而抑制 PDGF-BB所致的增殖, 其作用 机制可能与其提高 eNOSmRNA表达、降低 c- fos和 CyclinD1 mRNA高表达有关。 关键词: 人参总皂苷;血管平滑肌细胞; 增殖;细胞周期; 内皮 型一氧化氮合酶; 原癌基因 c- fos; 血小板源性生长因子 血管平滑肌细胞 ( vascu lar smooth muscle cel,l VSMC)的异常增殖是许多血管增生性疾病, 如动脉 粥样硬化、经皮腔内冠状动脉成形术 ( PTCA )后再 狭窄、血管移植术后新生内膜形成等发生发展的重 要致病机制之一 [ 1, 2] 。因此, 抑制 VSMC异常增殖 及逆转血管重构是提高血管肥厚性疾病患者生存率 和生存质量的重要环节。我们先前的研究表 明 [ 3- 5] , 人参总皂苷 ( to tal g insenosides, TG )、人参皂 苷 Rb1和 Rg1具有抗心肌肥厚的作用, 遵义医学院 药理学教研室利用整体动物模型也初步证实 TG能 抑制球囊导管损伤所致大鼠颈总动脉增厚, 但其抗 VSMC增殖效应及机制尚需进一步探讨。细胞增殖 周期是 VSMC增殖的基础, 其受多种因素的严格调 控。本研究的目的在于观察 TG对血小板源性生长 因子 ( PDGF)所致 VSMC增殖周期的影响, 探讨其 可能的作用靶点。 1 材料与方法 1. 1 实验动物 ` SD( Spragye-D aw ley)大鼠, 清洁 级, 体重约 200 g, 由第三军医大学大坪医院实验动 物中心提供 (许可证: SCX。 1. 2 试剂与材料 TG: 北京天然药物研究院提供, 从人参茎和叶提取所得, 总皂苷含量约 93%。其他 试剂及来源如下: 血小板源性生长因子 - B