石蜡组织荧光原位杂交关键实验步骤探讨.pdfVIP

???? 生? 物? 技? 术? 通? 讯 ? ????????????????????????????·． ??斗??。??·???????????? ???：??．?????．????．?????????．????．??．???? 技 术 方 法? 石 蜡 组 织 荧 光原 位 杂 交关 键 实验 步 骤探 讨? 李 江超?，卢玉 芬?，兰 天?，章倩 倩?，亓翠玲?，陈金 娜?，关新 元?，王 丽京? ?．广 东 药学 院 血 管研 究 所 ，广 东 广 州 ??????；?．桂 林 医学 院 生物 技 术 系 ，广 西 桂 林 ??????；?．香 港 大 学 临? 床 肿 瘤研 究部 ，香 港? ?摘 要 ?? 目的 ：探 讨 石 蜡 组 织 荧 光 原 位 杂 交 ??????技 术 中关 键 实验 步 骤 的最 佳 条 件 ，以期 提 高 石 蜡 切 片 ???? 阳性 细? 胞 检 出率 和 实 验 成 功 率 。 方 法 ：在 前 期 标 本 处 理 方 面 ，进 行 双 蒸 水 、?．?????溶 液 、?．?％硫 代 亚硫 酸钠 溶 液 煮 沸 对 比 ；? 在 蛋 白酶 消 化 方 面 ，设 置 胃蛋 白酶 和 蛋 白酶 ?两 种 消 化 方 法 ，并 在 ??℃ 条 件 下 设 置 时 间的 梯 度 变 化 ，比 较 其 消 化 效? 果 ；对 石蜡 切 片 的 变性 设 置 温 度 梯 度 ，比较 杂 交 检 出率 ；比较 ????复染 时不 同浓 度 对 单 色 、双 色 ????结 果 的 影 响 ；应? 用 抗 淬 灭 剂 后 不 同保 存 时 间 的对 比 。结 果 ：采 用 ?．?????溶 液 煮 沸 ??????，用 ??????／??蛋 白酶 ?在 ??℃ 、?～??????? 条 件 下 消 化 ，可 以取 得 较 好 的 ????效 果 ；变 性 温 度 为 ??℃ 时 检 出率 更 高 ，????复 染 浓 度 为 ???????／??时 针 对 单 色? ????较 合 适 ，而 浓度