试剂组成.docVIP

试?剂?组?成 精密度微孔板96孔（Microtitration?Strips）1块2～8℃干燥保存酶标偶合液（Conjugate?）???1瓶?12.0毫升2～8℃冷藏保存标准品（Standard）5瓶?各1.0毫升2～8℃冷藏保存呈色剂A（Substrate?A）?1瓶?6.0毫升2～8℃避光冷藏保存呈色剂B（Substrate?B）?1瓶?6.0毫升2～8℃避光冷藏保存终止液（Stopping?Solution）1瓶?6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液（Rinsing?Buffer?x?20）1瓶?60.0毫升2～8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液（Diluent?x?5）1瓶?15.0ml2～8℃冷藏保存英文说明书，中文说明书各一份室温保存 二、注意事项 1.??此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。 使用前???将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟， 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。 三、实验前准备 1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。 2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等 3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液 4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液 5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。） 四、操?作?步?骤 1．取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中（空白孔视为0号标准品，用医用蒸馏水替代） 2、分别标记样品编号，加入100μl的稀释样品于空白微孔中（不同的样本采用不同的吸头）。 3、将酶标???置于37℃温育30分钟； 4、将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体; 5、每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。 6、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。 7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。 8、将96孔板置于37℃温育30分钟。 9、将酶标板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。 10、每个孔中再次加满洗涤应用液后，室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。 11、重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。 12、在每个孔中加入底物A?50μl后立即加入底物B?50μl。轻轻振荡混匀。（A液、B液采用不同的吸头加样） 13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。 14、每个微孔中加入50μl的终止液，轻轻振荡混匀。 15、在酶标仪上，450nm处测定OD;?显色后，15分钟内进行测定。 16、根据制备的标准曲线，计算样本含量 五、结?果?判?断 1.?仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值； 2、检测值范围：0－1600pg/ml 3、敏感度：1.0pg/ml