PCR结合反向膜杂交快速鉴定临床常见念珠菌方法学的建立.pdfVIP

—８０７１— Chin J Lab D iagn ，１０ ，２０１１ ，V ol１５ ，N o ．O ctober 文章编号 ：１００７ － ４２８７（２０１１）１０ － １７０８ － ０４ PC R 结 合 反 向 膜 杂 交 快 速 鉴 定 临 床 常 见 念 珠 菌 方 法 学 的 建 立 李 娟 ，李从荣 ，李 艳 ，顾 剑 （武汉大学人民医院 检验科 ，湖北 武汉 ４３００６０） 摘要 ：目的 建立 PCR 结合反向膜杂交技术快速检测临床常见致病念珠菌的方法 。 方法 根据真菌 rDNA 高度 可变区设计白色念珠菌 、热带念珠菌 ，近平滑念珠菌 ，都柏林念珠菌 ，光滑念珠菌 、克柔念珠菌的种特异性探针 ，加尾后 固定在尼龙膜上 ，生物素标记的通用引物扩增转录间隔区 ITS１ ，利用反向膜杂交技术快速检测念珠菌种群 。 结果 以 上六种念珠菌均能扩增出大小为 ２１８ bp 的条带 ，每张膜上只有与靶序列对应的探针点有阳性结果 ，其他探针点均为 阴性 。 正常人类基因组 DNA 及临床常