实验一 血堑腻蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳.docVIP

实验一 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 【实验目的】 了解电泳的一般原理，掌握醋酸纤维素薄膜电泳操作技术。 测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量。 【实验原理】 带电荷的胶体粒子在电场中移动的现象称电泳。醋酸纤维素薄膜电泳法是以醋酸纤维素薄膜作为支持物。 血清中含多种蛋白质，当在pH这8.6时，这些蛋白质均带负电，它们在电场中向阳极移动，由于各种蛋白质所带负电荷多少及颗粒大小不同，所以在同一电场，同一pH环境中涌动速度不同。 本实验以醋酸纤维素为电泳支持物，分离各种血清蛋白。血清中含有清蛋白，α~球蛋白，β~球蛋白，γ~球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分，立体构象，分子量，等电点及形状不同，在电场中迁移速度不同。分子量小，等电点低，相同碱性pH。 表1 人血清中12种蛋白质的等电点及分子量 蛋白质名称等电点（pl）分子量清蛋白 α~球蛋白 β~球蛋白 γ~球蛋白4.88 5.06 5.12 6.85-7.5069000 α1—200000 α2—300000 90000—150000 156000—30000缓冲体系中，带负电喝多的蛋白质颗粒在电场中移动速度快。例如，以醋酸纤维素薄膜为支持物，正常人血清中pH=8.6的缓冲体系中电泳1h左右，染色后可显示5条区带。清蛋白泳动最快，其余依次为α1~，α2~,β~及γ~球蛋白。这些区带经洗脱后可用分