2013年冬小麦缎鲁害实验方案.pdf

???? 年冬小麦冻害实验方案 一、材料 供试小麦品种为临优 ????，济麦 ??，新 ??，济麦 ??，实验于山西农业大学 农作站进行，播种时间 ???? 年 ? 月 ?? 日，???? 年 ?? 月 ? 日出苗，其中济麦 ?? 为冬性，济麦 ?? 为半冬性。 二、冻害处理： 温度：??、?℃、??℃、??℃、??℃、??℃、??℃ 时间：??、??、???、??? 每个处理 ? 盆小麦 三、指标测定： ? 月底至 ? 月初统计死蘖（苗）率及叶片冻伤面积来确定冻伤来确定是否发 生冻害以及冻害等级。 冻害胁迫前期、冻害胁迫中期、冻害胁迫后期，以及拔节期、孕穗期、抽穗 期、灌浆期、扬花期、成熟期，从每个处理中取 ?? 片生长一致主茎的最新全展叶， 用液氮速冻后于－??℃保存，用于其他指标含量的测定。 （一）形态学指标测定 ??叶绿素含量测定： ???? 用 ??????? 测量?相对含量 ?— ????每株同部位叶片的叶尖部、中部和叶 鞘部叶绿素含量，取均值可粗略测量叶绿素的含量 ????? 分光光度计法 实验材料：新鲜小麦叶片 仪器设备： 分光光度计；电子天平（感量 ?????）；研钵；棕色容量瓶；小 1 漏斗；定量滤纸；吸水纸；擦境纸；滴管。 试剂：??％乙醇（或 ??％丙酮）；石英砂；碳酸钙粉。 实验步骤： （?）取新鲜小麦叶片，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。 （?）称取剪碎的新鲜样品 ????，共 ? 份，分别放入研钵中，加少量石英砂 和碳酸钙粉及 ?～?????％乙醇，研成均浆，再加乙醇 ????，继续研磨至组织变白。 静置 ?～????。 （?）取滤纸 ? 张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过 滤到 ???? 棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣 一起倒入漏斗中。 （?）用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸 和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至 ????，摇匀。 （?）把叶绿体色素提取液倒入光径 ??? 的比色杯内。以 ??％乙醇为空白， 在波长 ?????、????? 下测定吸光度。 实验结果计算：将测定得到的吸光值代入下面的式子： Ca ?????? A665 － ???? A649 ；Cb ?????? A649 －???? A665 。据此即可得到叶绿素 ? 和叶绿素 ? 的浓度（ Ca 、 Cb ：????），二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据下式可进一步求出植物组织中 叶绿素的含量： 叶绿素的含量（????）??叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数??样品鲜重（或干重） ??叶片及茎秆含水量测定 剪 ? 片新鲜叶片称其重量，然后置于烘箱中 ??? 摄氏度 ? 小时烘干，称其干 重，小麦含水量?（鲜重?干重）?鲜重×???? （二）生理指标测定 2 ????? 活性测定 材料：小麦叶片 ????×? 试剂配制： ???? ???? 磷酸缓冲液 ????? NaH PO NaH PO ? ? ? ? ? 液：????? 2 4 溶液（?????? 2 4 ?? H 2O 定容 ????） ? ? ? ? ? 液：????? Na2 HPO4 溶液（??????? Na2 HPO4 ??? H 2O 定容 ????） ? ? ? ? ??????（?）??????（??稀释至 ?????，即为 ???? 磷酸缓冲液 ????? ????? ????? ???????? 缓冲液 ?????