第四章紫外-可见分子吸收光谱法.pptVIP

第四章 紫外-可见分子吸收光谱法 (UV-VIS spectrometry);二、分子吸收光谱的分类和特征;a b c;分子的电子光谱的特点：;A;可进行分子的定性和定量分析 可用于一些物理化学常数的测定（如平衡常数等） 仪器结构简单、价格便宜 应用范围广泛（无机离子、有机化合物、生物大分子分析等） ;一、吸收光谱与分子结构;?? ?*跃迁 能量很大 吸收光谱在真空紫外区 多为饱和烃;n ? ?* 跃迁 所需能量小于? ? ?*跃迁（150-250 nm） 含有未共用电子对（n电子）原子的饱和化合物都可发生 跃迁的摩尔吸光系数比较小，一般在100-3000 L / mol cm;? ? ?* 和 n? ?* 跃迁 ? ? ?* 和 n? ?* 跃迁能量低（200 nm） 含有不饱和键的有机分子易发生这类跃迁 ;生色团 —— 含有? 键不饱和官能团 助色团 —— 基团本身无色，但能增强生色团颜色 为含有n电子，且能与?电子作用， 产生n ? ? 共轭;;影响紫外-可见光谱的因素;2、无机化合物的吸收光谱;例如： H2O 配位场 NH3 配位场 Cu 2+ — 水合离子 794 nm 浅蓝色 Cu 2+ — 氨合离子 663 nm 深蓝色 ;;金属离子影响下的配体 ? ? ?* 跃迁;小结： 分子结构——光谱特征——定性分析 ;Io;Ix;a;因此俘获光的几率应为：;a1;;;令 ?i = 0.4343Nai;A = ? b c;?1 ?2 ?;设;;当?1 = ?2 = ?;A;特别是存在非吸收线(或吸收很小,杂散光)和浓度较大时，I变的 很小， I i;?;350 380;三、紫外-可见吸收光谱的灵敏度;若1%吸收 A=0.0044 b = 1 C=;思考题;第三节 紫外-可见分光光度计;讨论：与原子吸收光谱仪比较： 光源的单色性 单色器 样品室 检测器;1、光源 钨丝灯 卤钨灯 氢灯和氘灯 ;D2 灯;2、单色器 光栅——棱镜 与原子吸收要求类似;4、样品室;二、紫外-可见分光光度计 1、单光束仪器;单光束仪器的缺点： 操作麻烦： ;2、双光束仪器;双光束仪器的特点和不足： 测量方便，不需要更换吸收池 补偿了仪器不稳定性的影响 实现了快速自动吸收光谱扫描 不能消除试液的背景成分吸收干扰;3、双波长仪器;?/nm;( 1 )消除光谱重叠干扰 A?1 = Aa ?1 + Ai ?1 A?2 = Aa ?2 + Ai ?2 Ai ?1 = Ai ?2 ?A = Aa ?2 - Aa ?1 =（?a?1 -?a?2）bCa;双波长仪器能否消除背景干扰？ ;则 ?A = lg I1/ I2 =（? ?1 -? ?2）bC 因此测量两波长 吸光度之差，就 消除了背景吸收 的干扰。 ;( 3 ) 进行导数光谱测定;?/nm;?/nm;A1 = ?11C1 + ?12C2 + ?13C3 A2 = ?21C1 + ?22C2 + ?23C3 A3 = ?31C1 + ?32C2 + ?33C3;一、络和物组成的测定;摩尔比率法测定络和比：;A; 若络合物稳定性差，络合物解离使吸光度下降，转折不明显，据此可以测定络合物不稳定常数。 设：络合物解离度为 ?，不解离时转折处浓度为 C;? = ;二、酸碱离解常数的测定;A=?HB（c- [B-]) +?B-[B-] ;Ka=;;;0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0;;只有当;四、紫外-可见分子吸收光谱的发展;二、长光程紫外-可见分光光度计;双 叉 光 纤;第五节 荧光、磷光和化学发光分析法 （Fluorescence，phosphorescence and chemiluminescence analysis）;（1）分子吸收光谱与分子荧光光谱;300 400 500;（2）荧光量子产率（荧光效率）;化合物 荧光效率 溶剂 荧光素 0.92 （0.1MNaOH） 曙红 0.19 （ 0.1MNaOH） 罗丹明B 0.97 （乙醇） 蒽 0.31 （己烷） 核黄素 0.26 （水，pH7） 菲 0.10 （乙醇） 萘 0.12 （乙醇） 酚 0.22 （水） 叶绿素 0.32 （苯）;;;2、 荧光定量分析基础;将指数展开：;K =;（2）荧光熄灭;内滤效应 发射的荧光在溶液中通过时被基态分子所吸收而使荧光强度下降的现象。; 淬灭效应 碰撞淬灭： 荧光分子之间或荧光分子与熄灭剂分子之间碰撞引起的荧光熄灭效应;转