在单一提取系托鲁中同时测定五种植物抗氧化酶.pdf

第 22 卷第 6 期 云南师范大学学报 Vol. 22 No. 6 2002 年 11 月 Journal of Yunnan Normal University Nov. 2002 在单一提取系统中同时测定五种植物抗氧化酶X 李忠光1, 李江鸿2, 杜朝昆1, 黄号栋1, 龚 明1 ( 1. 云南师范大学生命科学学院, 云南 昆明 650092; 2. 思茅高等师范专科学校, 云南 思茅 665000) 摘 要: 文章介绍了在一个单一酶提取系 统中同时提取并 测定五种 抗氧化酶。通过 对酶测 定反应 的 动力学分析, 确定了各个酶测定的适宜参数。这一提 取和测定系 统使多种 抗氧化酶的 提取变 得简便 快 速, 并使酶活性测定结果有较好的准确性、重复性和可比性。 关 键 词: 单一提取系统; 抗氧化酶系统; 动力学 曲线; 酶活性 中图分类号: 946. 5 文献标识码: A 文章编号: 1007- 9793( 2002) 06- 44- 05 植物细胞在其生命活动过程中, 由于叶绿体、 定的文献中绝大部分均未给出酶促反应的动力学 线粒体和质膜上每时每刻发生的电子传递过程中 变化情况。而酶促反应动力学的分析关系到酶活 的电子泄漏, 而不可避免地总会产生大量的活性 性的准确测定。在不同的反应时间内, 酶促反应 氧。活性氧会导致生物大分子及膜系统的过氧化 的速度不同, 如果不同研究者采用的反应时间不 反应而损伤细胞。但植物细胞具有由多种抗氧化 同, 所测得的酶活性大小也不一样。为了使抗氧 剂分子及抗氧化酶所组成的抗氧化系统, 从而将 化酶活性测定在一定程度上得到简化和统一, 本 [ 1- 4] 活性 氧控制在细胞 可忍耐的 水平 。植物抗 文对五种抗氧化酶的提取系统和测定过程作了修 氧化酶系统有一系列的抗氧化酶如超氧化物歧化 改和完善, 用单一提取系统来提取五种抗氧化酶, 酶 、过氧化氢酶 、抗坏血酸专一性过 ( SOD) ( CAT ) 通过酶促反应的动力学分析, 确定了五种抗氧化 氧化物酶 、愈创木酚过氧化物酶 、谷 ( APX) ( GPX) 酶测定的适宜参数, 使抗氧化酶的提取和测定比 胱甘肽还原酶( GR) 等组成[ 1- 4] 。通过各抗氧化 以前更加快速简便, 而所得的测定结果有更好的 酶的协同作用 可把细胞内产生的具有很强氧化 , 准确性、重复性与可比性。 #- . 活性的活性氧如 O2 、H2O2、OH 等直接或间接 地清除, 防止了活性氧的级联放大作用, 阻止和延 缓了细胞膜系统的脂质过氧化作用及生物大分子 材料和方法 如蛋白质和核酸的氧化损伤, 保障了细胞内各种 生命代谢活动的正常进行。因