PELS55荧光磷光发光分光光度计.doc

复旦大学药学院仪器测试中心 PE LS 55 荧光/磷光/发光分光光度计标准操作规程 部 门：药学院仪器测试中心 实施日期：2012年12月25日  PE LS 55 荧光/磷光/发光分光光度计标准操作规程 一、仪器开/关机程序 1、开机程序 打开与仪器相连的计算机，待计算机完全启动后，打开荧光分光光度计的电源。等待2-3分钟后，从桌面打开FL WinLab软件。 2、选择光源模式 2.1 在“Application”下拉菜单中选择“Status”，出现Status窗口，点击“Source”图标可进入光源模式。 2.2 荧光测定模式的设定：在“Luminescence Mode”中选择“fluor（荧光）”，即可选定荧光测定模式。通过点击右上角的红色数字“１（氙灯开）”或“０（氙灯关）”，即可控制光源的开关。 2.3磷光测定模式的设定：在“Luminescence Mode”中选择“phos（磷光）”，即可选定磷光测定模式。 2.4发光（化学、生物）测定模式的设定：在“Luminescence Mode”中选择“biolum（发光）”，即可选定发光测定模式。 3、选择测定模式 3.1 扫描模式（Scan） 在“Application”下拉菜单中选择“Scan”，出现扫描模式设定窗口。可选的扫描方式有包括预扫描、激发或发射光谱的扫描、同步扫描。选择需要的扫描方式，按需要设置激发（Excitation）和发射（Emission）波长的扫描范围，狭缝宽度（slit），扫描速度（scan speed），溶剂种类（Solvent），保存图谱的名字（Result Filename）等参数。 3.2 时间驱动模式（Time driver） 在“Application”下拉菜单中选择“Time driver”，出现时间驱动模式设定窗口。设置激发波长（Excitation wavelength）和发射波长（Emission wavelength），狭缝宽度（slit），总扫描时间（Duration），扫描的时间间隔（Data interval），时间单位（seconds/minutes），保存图谱的名字（Filename）等参数。 3.3 强度/浓度模式（Read） 在“Application”下拉菜单中选择“Read”，出现强度/浓度模式设定窗口。将所含已知浓度的样品标准溶液放入样品室，确认所需的波长及狭缝均已设好，选定Autococn行，并在下面的小框中键入该标准溶液的浓度值，键入所需的信号积分时间，单击Intensity，标准溶液的荧光强度值会显???在其右边的小框中，此值自动被刚才输入的浓度值所除，得到其商Ｋ并暂存，只要一直选定Autococn行，以后的样品测定所得的荧光强度会自动乘上Ｋ值而成为浓度值显示。 3.4 波长编程扫描模式（Wavelength Program） 在“Application”下拉菜单中选择“Wavelength Program”，出现波长编程扫描模式设定窗口。设定好需要的激发和发射波长序列。 3.5 用标准曲线法测定浓度的模式（Concentration） 在“Application”下拉菜单中选择“Concentration”，出现用标准曲线法测定浓度的模式的设定窗口。设定激发波长、最大发射波长及激发与发射狭缝等参数。在Reference页中，输入一系列标准样品所对应的浓度及并测量相应的荧光强度值，即可回归出相应的一元或多元的回归方程。在Samples页中输入相应的数据。在View results页中查看待测样品的浓度。 4、关机程序 样品测定完毕后，依次关闭操作软件、仪器、计算机，最后关闭总电源。 二、注意事项 取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。