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动物细胞培养和核移植技术;动物细胞培养;动物细胞培养和
核移植技术;一、动物细胞培养过程;动物细胞培养概念:;动物胚胎或幼龄动物的组织、器官; 2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞分散?; 3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?;4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?; 5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?;3、动物细胞培养过程中几个重要的概念;;接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。
;3.原代培养 (primary culture);定义:当原代培养的细胞生长停止,这时如果要使细胞继续生长,就要及时用胰蛋白酶等,使细胞从瓶壁上解离下来,然后加入新的培养液,将细胞分???稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养; 细胞株:
从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质没有发生变化。;细胞悬浮液;1、无菌、无毒的环境
添加一定量的抗生素,定期更换培养液
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、促生长因子,无机盐、维生素、动物血清、微量元素等)
3、温度和PH
温度36.5+0.5度,pH7.2~7.4
4、气体环境
O2和CO2(95%空气和5%CO2 );思考:动物血清的作用?;动物细胞培养液的主要成分:;5、动物细胞培养技术的应用;获得细胞; 1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是
A.都需用培养箱
B.都须用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行
D.都可体现细胞的全能性; 2、下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是
A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株; 4、细胞株的特点是
A.遗传物质没有改变,可以无限传代 B.遗传物质发生改变,不可无限传代 C.遗传物质没有改变,不可无限传代 D.遗传物质发生改变,且有癌变特点,可以无限传代
5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称之为:
A.原代培养 B.传代培养
C.细胞株 D.细胞系; 7.(09江苏)下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞 。
(2)气室中充入5%C02:气体的主要作用是 。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ,以保证抗生素对肝脏无害。;08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题:
⑴在动物细胞培养的过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 。此时,瓶壁上形成的细胞层数是 ,要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是 。
⑵随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现 的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞,该种细胞的黏着性 ,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量 。;⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
⑸在细胞培养过程中,通常在 条件下保存细胞,因为在这种条件下,细胞中 的活性降低,细胞的
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