RPHPLC法测定心可舒片中葛根素的含量.docVIP

　　RPHPLC法测定心可舒片中葛根素的含量 【摘要】 　　［目的］建立心可舒片中葛根素的HPLC含量测定 方法 。［方法］高效液相色谱法；色谱条件：ZORBAX Eclipse XDBC18，柱温25摄氏；流动相：甲醇-水-磷酸（23∶77∶0.5）；流速：1.0ml.min-1;检测波长；250nm。［结果］葛根素在25ng～250ng范围内，线性关系良好，回归方程为Y=4663.9774X（r=0.9998），平均加样回收率为102.34%，RSD=2.7197%（n=5）。［结论］本方法稳定、可靠、操作简便、快速、重现性好，可用于心可舒片葛根素的质量控制。 【关键词】 心可舒片 葛根素 高效液相色谱法 　　Abstract:［Objective］Set up measurement method for measuring puerarin in Xinkeshu tablets atogram:ZORBAX Eclipse XDBC18;column temperature:25C degree;floethanoll·min-1;tested .［Result］In the range of 25ng～250ng,puerarin has good linear relationship,ple reclaim rate is 102.34%，RSD=2.7197%（n=5）［Conclusion］ The method is stable, reliable, easy to operate, quick, ，杭州化学试剂有限公司）；磷酸（041202，杭州化学试剂有限公司） 　 　2 色谱条件 　　Agilent公司Agilent1100 Series高效液相色谱仪，ZORBAX Eclipse XDBC18色谱柱；UVD检测器；流动相：甲醇-水-磷酸（23∶77∶0.5）；检测波长：250nm；流速：1.0ml·min-1；柱温：25℃；进样量：5μl。 　　 3 样品制备 　　3.1 葛根素对照品溶液的设备 　　精密称取葛根素对照品2.0mg置10ml容量瓶中，以30%乙醇溶解，并室温定容至刻度，摇匀，得到浓度为0.20mg·ml-1的葛根素对照品的储备液。精密吸取0.20mg·ml-1的葛根素1.00ml置5ml的容量瓶中，以30%的乙醇溶液室温定容至刻度，摇匀，得到浓度为40μl·ml-1的葛根素对照品溶液。 　　3.2 供试品溶液的制备 　　精密称取干燥至恒重的心可舒片 内容 物0.2g，置150ml具塞锥形瓶中，加入30%的乙醇溶液50.0ml，称重。于60℃超声20min，冷却至室温以后，补足减失的重量，摇匀，滤过。取续滤液作供试品溶液。 　　3.3 阴性对照溶液的制备 　　按处方比例称取除去葛根的其他药材适量，依照心可舒片制备工艺和供试品溶液的制备方法制备缺葛根的阴性对照液。 　　 4 实验方法 　　4.1 空白实验 　　在上述色谱条件下，精密量取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照品溶液各5ml，分别注入色谱仪。供试品色谱图中，在与对照品色谱图相应的位置上，有一相同保留时间的色谱峰，而缺葛根阴性对照液在此保留时间处无色谱峰。证明其它药材及辅料对葛根素的测定无干扰。 　　4.2 线性关系的考察 　　分别精密吸取浓度为40ml·ml-1葛根素对照液0.25ml、0.50ml、1.00ml、2.00ml及浓度为200mg·ml-1葛根素储备液0.50ml置2ml容量瓶中，以30%乙醇溶液室温定容至刻度，摇匀，配制得浓度为5mg·ml-1、10mg·ml-1、20mg·ml-1、40mg·ml-1、50mg·ml-1的葛根素标准系列，在上述色谱条件下，分别进样5ml进行测定。结果表明，在25ng～250ng范围内，葛根素对照品进样量与峰面积之间呈良好的线性关系。回归方程为Y=4663.9774X（r=0.9998）。该标准曲线通过原点，因此可采用外标一点法进行测定。 　　4.3 精密度实验 　　以浓度为20mg·ml-1葛根素对照品溶液，在上述色谱条件下连续进样6次，每次进样5ml，进行测定，峰面积RSD≤2%,证明仪器精密度符合要求。 　　4.4 稳定性实验 　　以心可舒供试品溶液，在上述色谱条件下，分别于0h、1h、2h、4h、6h、10h、24h进行5ml进行测定，峰面积RSD≤3%,证明心可舒公式也在24h内稳定 　　4.5 重复性实验 　　取同一批心可舒片样品（021101），按“3.2供试液的制备”项下制备6批供试液，并在上述色谱条件下进行测定。心可舒片中葛根素含量RSD≤3%,重复性符合要求。 　　4.6 加样回收率试验 　　精密称取已测得含量（