HPLC法测定大黄碳酸氢钠片中的大黄素和大黄酚的含量.docVIP

　　HPLC法测定大黄碳酸氢钠片中的大黄素和大黄酚的含量 【摘要】 ［目的］建立高效液相色谱法测定大黄碳酸氢钠片中大黄素和大黄酚的含量。［方法］ 采用高效液相色谱法;色谱柱为Shimpack clcODS（150×6.0mm，5.0um），流动相为甲醇0.1%磷酸（85∶15），流速为1.0ml/min，检测波长为254nm。［结果］ 此方法线性关系良好.大黄素和大黄酚的平均回收率分别为98.5％、99.3％，RSD=1.3％、0.4％（n=9）。［结论］本法简便、准确，重现性良好，可用于大黄碳酸氢钠片的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法; 大黄碳酸氢钠片;大黄素;大黄酚 　　Abstract：［Objective］ TO establish an HPLC method for the determination of emodin and chrysophanol in rhubarb sodium bicarbonate tablets.［Methods］ An HPLC method atographic column pack clcODS（150×6.0mm，5.0um）;The mobile phase ethanol0.1% phosphoric acid （85：15）;Velocity of flol/min;The detaction .［Resulet］ The linearty of this method odin and chrysophanol average recovery rates ethod is simple,accurate bicarbonate tablets. 　　Key bicarbonate table; emodin; chrysophanol 大黄碳酸氢钠片是复方制剂，主要成份是由大黄、碳酸氢钠、薄荷油等组成，是助消化药及抗酸药类非处方药药品，主要用于食欲不振、胃酸过多［1］。大黄碳酸氢钠片的质量标准收载于卫生部药品标准化学药品及制剂第一册中［1］，并没有对大黄进行含量测定的内容，本文采用高效液相色谱法对其大黄素与大黄酚的含量进行测定。 　 　1 仪器、样品及试药 Agilent 1200高效液相色谱仪，Agilent Technologies 1200 DAD检测器，Agilent chemststion工作站。大黄素对照品（ 中国 药品生物制品检定所，批号：110756200110），大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110796200513），大黄碳酸氢钠样品（市售，上海黄海制药有限责任公司，批号：070610、070912、080417）；甲醇为色谱纯，水为纯化水。 　　 2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：Shimpack clcODS（150×6.0mm）；流动相：甲醇0.1%磷酸（85∶15）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；进样量：10μl。 　　2.2 溶液的制备 　　取大黄素和大黄酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含大黄素113.0μg和大黄酚121.7μg的溶液，作为对照品溶液。另取大黄碳酸氢钠片样品适量，研细，取约1片的量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 　　2.3 专属性试验 　　分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL，注入色谱仪，记录色谱图（见图1～4）。由图1～4可见，大黄素和大黄酚两色谱峰分离良好，且其他各味药材及辅料对含量测定无干扰。 　　2.4 线性关系考察 　　分别精密吸取大黄酚（浓度为121.7μg/ml）和大黄素（浓度为113.0μg/ml）对照品溶液1ml、2ml、3ml、5ml、10ml置于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，分别注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以大黄酚峰面积积分值（A）为纵坐标，浓度（x）为横坐标绘制标准曲线，结果见表1。表1 大黄酚、大黄素含量测定线性试验（略）注：结果表明：大黄酚和大黄素线性关系良好。 　 　　2.5 精密度试验 　　精密吸取同一大黄酚（浓度为121.7μg/ml）和大黄素（浓度为113.0μg/ml）对照