原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案.doc

原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及 机制研究：随机对照实验方案 罗夙医1，黄 薇2，王 晶3，王玺赟4，李劲涛3 (昆明医科大学，1病原生物学与免疫学系，3神经科学研究所，42012级麻醉专业，云南省昆明市呈贡新区 650500；2云南省第三人民医院神经内科，云南省昆明市 650011) 引用本文：罗夙医，黄薇，王晶，王玺赟，李劲涛. 原肌球蛋白4通过慢病毒重组体技术应用于脊髓损伤后的作用及机制研究：随机对照实验方案[J].中国组织工程研究，2016，20(37):5573-5579. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.37.015 ORCID: 0000-0002-1661-9305(罗夙医) 文章快速阅读： 文题释义： 原肌球蛋白原肌球蛋白4(TPM4)的功能/设计：①随机对照动物实验：建立脊髓全横断损伤大鼠模型，通过2-DE双向电泳、氨基酸系列分析、q-PCR和Western-Blot方法明确脊髓横断损伤3-28 d在损伤脊髓头侧原肌球蛋白4的表达变化。②基因水平的机制探索实验：用基于体外慢病毒重组体技术敲除原肌球蛋白4，研究其对体外培养的脊髓神经元树突生长长度的作用；并通过BBB评分法评估原肌球蛋白4敲除对脊髓横断损伤大鼠运动功能恢复的作用。 讨论：实验结果拟为脊髓横断损伤后促进运动功能恢复的治疗提供一种基于慢病毒重组体为载体携带原肌球蛋白4干扰RNA的、新的、有效的分子治疗策略，并阐明其治疗作用机制，为临床脊髓全横断损伤的基因治疗开辟乐观的应用前景。 伦理批准：研究经昆明医科大学医学伦理委员会批准，大鼠的外科操作和术后护理遵循中国实验动物保护和伦理委员会的规定，并与美国国立卫生与健康研究院的指南一致。 关键词： 组织构建；组织工程；原肌球蛋白4；脊髓损伤；基因敲除 主题词： 脊髓损伤；原肌球蛋白；基因敲除技术 基金资助： 云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项 缩略语： 原肌球蛋白4：Tropomyosin 4，TPM4 Effects of tropomyosin 4 applied in spinal cord injuries via lentiviral vector recombination and the underlying mechanism: study protocol for a randomized controlled trial Luo Su-yi1, Huang Wei2, Wang Jing3, Wang Xi-yun4, Li Jin-tao3 (1Department of Pathogenic Biology Immunology, 3Institute for Neuroscience, 4Department of Anesthesiology Grade 2012, Kunming Medical University, Kunming 650500, Yunnan Province, China; 2Department of Neurology, the Third People’s Hospital of Yunnan Province, Kunming 650011, Yunnan Province, China) Abstract BACKGROUND: Tropomyosin 4 level has been found to be an increase in the spinal cord based on the 2-DE/MALDI-TOF/MS method. However, there is little report about the relationship between tropomyosin 4 and pathogenesis and progress of spinal cord injuries. METHODS/DESIGN: Randomized controlled trial: rat models of complete spinal cord transection were made and expression levels of tropomyosin 4 at 3-28 days after modeling were determined by two-dimensional electrophoresis, animo acid serie analysis, quantitative PCR and western blot. Experiment for exporin