可供采供血机构常规使用的红细胞深低温保存方法的初步筛选.pdfVIP

中冈丁程热物理学会 传热传质学 学术会泌论文 编号：073306 可供采供血机构常规使用的红细胞深低温 保存方法的初步筛选， 赵刚1 刘志峰卜郭晓婕2李素萍z 舒志金2 张晓光2 方芹2 吕蓉2刘忠2 (1．中阂科学技术人学T程科学学院生物力学实验室．含肥，230027： 2．含肥市红r，会中心j『|L站低温生物医学实验室，合肥，23()031) o rIzf’l (Tc㈧3856【)42635，Ema儿zhaog@ustc．edu．cn23⑨ustc．edu．cn) 摘要：比较例：究J’5种人类红细胞液氮深低温保存方法的优劣。结果表叫：35．5％(w／V)汀油的保存效果 J口|收率为85．08％；小次之为lM海藻糖(加 最佳，iI吲收；红矗：97．84％：臻次为25％(w／v)右旋糖酐40，』L 找并孵育17．5h)，其I口|I收；簪为55．35％； 牢均小足35％。初步摊断，右旋糖酐40足一种日，掣替代¨‘油的红l_|}|胞低温保护剂。 关键词：红细脾： 低温保存： 孵育： 台旋糖酐40， 卜引言 实现红细胞的长期保存∥乙个月，几年，甚至，‘L个世纪■可从根本上减少血液报废 所致地巨火浪费、彻底消除稀有血型患者输血面临的种种困难i真正实现理想的臼体输 注方式(称为“绿色输血”)。目前常用的红细胞K其I：I保存方法有低温冷冻保存(含玻璃化 保存)和冷冻干燥保存等。20世纪60年代起，已有科学家开始研究红细胞的冻干保存， 虽取得了初步成功，j但其嗣收率一般不超过50％，冈此，红细胞冻干保存技术目前还处 于探索阶段，尚未获得临床应用，其保存方法和损伤机理有待进一步研究【3l。此外，冷 冻干燥过程一般包括物料的预处理或制备、物料的冷却㈣化过程、升华干燥(一次干燥) 过榉、解析干燥(二次干燥)过稃、封装和储存等5个典型步骤，耗时十几个甚至儿十个 小时，如红细胞冻千过程往往耗时40h左右f¨。红细胞是最早获得低温保存及临床输注 成功的生物材料之一，低温冷冻保存红细胞，日前已府坩丁临床，但冰冻红细胞的制备 和使刖过徉尚存在诸多不便之处。目前采供由．机构常州的红细胞低温保护剂为甘油，保 存方法有3种，即高浓度甘油慢冻法(甘油终浓度为40．80％)、低浓度甘油快冻法(甘油 终浓度为10～20％)和玻璃化低温保存方法吼由于高浓度甘油对中枢神经有直接作朋和 渗透障碍，可引起溶血或产生其他～些毒副作用，如头晕、恶心等，冈此复温后的红细 胞在临床输注前需经过不用浓度的NaCI溶液多次离心洗涤，使甘油含餐低丁．1％，然后 刚生理盐水稀释后使用。红细胞洗涤过程(去除低温保护剂)耗时费力，且会引起一定程 度的溶血，冈此往往不能满足临床抢救病人的急需。若能简化低温保存红细胞临床输注 前的处理时间和步骤，则能从根本上解决该问题。 t_ DMsO等低温保护荆对丁．红细胞的保存效果，通过初步的实验结果分析。寻求可以替代 时油行简化复温斤洗涤过稗的较为理想的红细胞低温保护剂。 2实验方法 1012 2．1试剂 海藻糖溶液和10％(w／v)二甲基弧砜溶液，待瑚。 2．2低温保存 (1)红细胞分离及洗涤。从合肥市红十字会中心血．站获取健康捐献者新鲜静脉血-， NaCI(、“v)，即生理盐水中。．然J；彳，州生理盐水离心洗涤3次。最终获得浓缩红细胞悬 液，川乐积管测得其压积约为80％。 溶液能够滴入烧杯，并控制滴定流速，5～10min完成CPA加载过程，即10mICPA溶 液全部滴入烧杯。 (3)孵育。为比较细胞内外丽侧均存在海藻糖时与细胞外单侧存在海藻糖时，海藻 糖的低温保护效果的差异，对丁添加了lM悔藻糖的红细胞悬浮液，分别做直接冷冻组 内