诊断学——临床常见病原体检测.ppt

（四）耐药菌检测的意义 检出耐药菌需采取的重要措施： 接触隔离！！ （五）病原体耐药基因检测 耐药基因的产生：1、获得外源性基因 2、细菌自身基因突变 细菌耐药基因检测方法：PCR法、生物芯片、PCR-RFLP分析、 动测序、PCR-SSCP分析 三、临床常见病原体检测 细菌、病毒、真菌、寄生虫、支原体、衣原体以及立克次体等。 （一）细菌感染检查项目的选择 细菌感染 抗原抗体检测 PCR技术 基因探针技术 培养 涂片镜检 （二）病毒感染检查项目的选择 电镜检查 核酸检测（PCR） 细胞培养 特异性抗体检测 （三）真菌感染检查项目的选择 真 菌 培养 涂片镜检 抗原检测 灾光定量PCR 核酸杂交技术 rDNA序列测序 基因组核酸电泳 核型分析 G试验 GM试验 （四）寄生虫病 病原学诊断 免疫学诊断 寄生虫 DNA探针技术 PCR （四）支原体检测 支 原 体 肺炎支原体：肺炎 解脲支原体、人型支原体： 泌尿生殖道感染 培养法 免疫荧光法 光定量PCR和DNA探针技术 （六）螺旋体检测 暗视野显微镜检查： 梅毒血清学试验 （1）过筛试验：RPR、VDRL、TRUST （2）确诊试验：FTA-ABS、MHA-TP、 TPPA TP-PCR：TP—PCR检测梅毒螺旋体DNA，特异性很强，敏感性很高，是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。PCR检测梅毒螺旋体的DNA，其敏感性、特异性均优于血清学方法 （六）螺旋体检测 （七）立克次体检测验 专性细胞内生长的原核细胞性微生物 对多种抗生素敏感 引起自然疫源性疾病，且为人畜共患 斑疹伤寒（流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、 加拿大斑疹伤寒） 立克次体属 斑点热（洛矶山斑点热、纽扣热、昆士兰热、 立克次体痘、北亚蜱传斑疹伤寒） （七）立克次体检测 外斐试验：为非特异性血清学诊断试验，用于 斑疹伤寒、斑点热和恙虫病的确诊 特异性血清学试验：免疫荧光试验、酶联 吸附试验和补体结合试验等 （八）衣原体感染检测 直接显微镜检查：检查衣原体包涵体 细胞培养：阳性可明确诊断。 直接荧光抗体检测 定量PCR DNA探针 （九）流感病毒的检测 病毒核酸检测 病毒分离培养 病毒抗原检测 血清学诊断 （十）严重急性呼吸道综合征（SARS）病毒的检测 免病学方法：免疫荧光试验（IAF） 酶联免疫吸咐试验（ELISA） 基因检测方法 细胞培养 实验结果分析和临床应用注意点 1、分离培养的阴性结果不能完全排除感染的可能; 2、抗原检测需考虑共同抗原引起的交叉反应； 3、核酸检测由于灵敏度高，影响因素多，容易出现假阳性或假阴性; 4、血清学试验：IgM现期感染,IgG既往感染。 四、 病毒性肝炎检测 病毒性肝炎主要有7型， 甲型(HA)---甲型肝炎病毒 (HAV) 乙型(HB)---乙型肝炎病毒 (HBV) 丙型(HC) ---丙型肝炎病毒 (HCV) 丁型(HD)---丁型(HDV)和戊型肝炎病毒 (HEV) 戊型(HE)---戊型肝炎病毒 (HEV) 庚型(HG)---庚型肝炎病毒 (HGV) 、 输血传播病毒肝炎---输血传播病毒(TTV) 目前常用的检测方法 酶联免疫吸咐试验（ELISA） 实时荧光PCR 聚合酶联反应（PCR） 放射免疫法（RIA） 血细胞凝集法 斑点杂交法 SARS（severe acute respiratory syndrome ）病原体的确定。