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诊断学——临床常见病原体检测
(四)耐药菌检测的意义 检出耐药菌需采取的重要措施: 接触隔离!! (五)病原体耐药基因检测 耐药基因的产生:1、获得外源性基因 2、细菌自身基因突变 细菌耐药基因检测方法:PCR法、生物芯片、PCR-RFLP分析、 动测序、PCR-SSCP分析 三、临床常见病原体检测 细菌、病毒、真菌、寄生虫、支原体、衣原体以及立克次体等。 (一)细菌感染检查项目的选择 细菌感染 抗原抗体检测 PCR技术 基因探针技术 培养 涂片镜检 (二)病毒感染检查项目的选择 电镜检查 核酸检测(PCR) 细胞培养 特异性抗体检测 (三)真菌感染检查项目的选择 真 菌 培养 涂片镜检 抗原检测 灾光定量PCR 核酸杂交技术 rDNA序列测序 基因组核酸电泳 核型分析 G试验 GM试验 (四)寄生虫病 病原学诊断 免疫学诊断 寄生虫 DNA探针技术 PCR (四)支原体检测 支 原 体 肺炎支原体:肺炎 解脲支原体、人型支原体: 泌尿生殖道感染 培养法 免疫荧光法 光定量PCR和DNA探针技术 (六)螺旋体检测 暗视野显微镜检查: 梅毒血清学试验 (1)过筛试验:RPR、VDRL、TRUST (2)确诊试验:FTA-ABS、MHA-TP、 TPPA TP-PCR:TP—PCR检测梅毒螺旋体DNA,特异性很强,敏感性很高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。PCR检测梅毒螺旋体的DNA,其敏感性、特异性均优于血清学方法 (六)螺旋体检测 (七)立克次体检测验 专性细胞内生长的原核细胞性微生物 对多种抗生素敏感 引起自然疫源性疾病,且为人畜共患 斑疹伤寒(流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、 加拿大斑疹伤寒) 立克次体属 斑点热(洛矶山斑点热、纽扣热、昆士兰热、 立克次体痘、北亚蜱传斑疹伤寒) (七)立克次体检测 外斐试验:为非特异性血清学诊断试验,用于 斑疹伤寒、斑点热和恙虫病的确诊 特异性血清学试验:免疫荧光试验、酶联 吸附试验和补体结合试验等 (八)衣原体感染检测 直接显微镜检查:检查衣原体包涵体 细胞培养:阳性可明确诊断。 直接荧光抗体检测 定量PCR DNA探针 (九)流感病毒的检测 病毒核酸检测 病毒分离培养 病毒抗原检测 血清学诊断 (十)严重急性呼吸道综合征(SARS)病毒的检测 免病学方法:免疫荧光试验(IAF) 酶联免疫吸咐试验(ELISA) 基因检测方法 细胞培养 实验结果分析和临床应用注意点 1、分离培养的阴性结果不能完全排除感染的可能; 2、抗原检测需考虑共同抗原引起的交叉反应; 3、核酸检测由于灵敏度高,影响因素多,容易出现假阳性或假阴性; 4、血清学试验:IgM现期感染,IgG既往感染。 四、 病毒性肝炎检测 病毒性肝炎主要有7型, 甲型(HA)---甲型肝炎病毒 (HAV) 乙型(HB)---乙型肝炎病毒 (HBV) 丙型(HC) ---丙型肝炎病毒 (HCV) 丁型(HD)---丁型(HDV)和戊型肝炎病毒 (HEV) 戊型(HE)---戊型肝炎病毒 (HEV) 庚型(HG)---庚型肝炎病毒 (HGV) 、 输血传播病毒肝炎---输血传播病毒(TTV) 目前常用的检测方法 酶联免疫吸咐试验(ELISA) 实时荧光PCR 聚合酶联反应(PCR) 放射免疫法(RIA) 血细胞凝集法 斑点杂交法 SARS(severe acute respiratory syndrome )病原体的确定。
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