应用量热法监控生物发酵过程.pdfVIP

中国工程热物理学会 传热传质学 学术会议论文 编号：083176 应用量热法监控生物发酵过程 许敏 曹东颖 童正明 （上海理工大学动力工程学院，上海 200093） （Tel：021E-mail:xm198484@163.com） 摘要：量热法是生物热化学的重要方法之一，适合于生物体系各个层次的研究。在生物反应器的发酵 过程中，量热法作为一种新的技术，简单适用，有着很大的市场前景。本文主要通过对生物发酵过程 中碳氮源进料情况变化时罐体热流变化的研究，得出热量控制对生物发酵的影响，从而为大规模生产 发酵过程的控制提供一定的指导意义。 关键词：量热法 生物发酵控制 反应热 在微生物活动中，利用量热法主要有两种基本的方法[1]：一种是目前发展比较快的 微量热技术，它是近代热化学，尤其是生物热化学领域里常常使用的技术；但是对于测 量微生物代谢活动的环境的变化状况时，微量热技术就略显不组，可以采用一种改进的 实验室规模热量计，来测得生物反应发酵过程中的代谢热变化。 在生物发酵反应的过程中，一般通过溶氧量，PH 值，呼吸商等方法来监测发酵反 应的过程，但都存在着或大或小的缺点。量热法作为一种比较简单可行的方法，已经开 始被研究如何应用在监测生物发酵的过程中。将量热法应用于发酵过程中，主要是通过 测量所有进出罐体的热流量，得到整个发酵罐的热流量平衡关系。如下公式： surfaceexchangermechanicmetabolicfeedbp qqqqqdt VTdc )(, 2coacidradiationnevaporatio qqqq  方程式左边表示积累的热量，右边分别是进料带入的热量，发酵热，机械搅拌热，交换 热，空气带走的热量，蒸发热，液体辐射热，酸的中和热，产物 CO2 带走的热量。 用更清楚的方式表达如下[1]： )()()()( ,,, rdafairairpairairfmmpmmbpb HHFTTcFTTcFdt VTdc   )()( inw out w o wairsurrfsursurLexchexchLQ PPHFTTAUTAUVr  2 )( 44 COcffsur HFTTA   在连续实验的过程中，我们知道，上式方程的值为 0。这是因为起始开始时温度被 设定在某一定值上，这样累积的热量就为 0。那么通过测得计算方程中其他热源的热量 值，就可以计算得到反应过程中由于代谢产生的热量。 我们知道，培养基里碳氮比对生物发酵的影响非常明显。一般来说，氮源过多，会 使菌体生长过于旺盛，pH 偏高，不利于代谢产物的积累；氮源不足，则菌体繁殖量少， 从而影响产量。碳源过多，则容易形成较低的 pH；若碳源不足，容易引起菌体衰老和 自溶。另外碳氮比不当还会影响菌体按比例地吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长 和产物的形成。菌体在不同的生长阶段，其对碳氮比的最佳要求也不一样。一般碳源因 为既要作碳架又要作能源，因此用量一般要比氮源多。从元素分析来看，酵母菌细胞中 碳氮比约为 100：20，霉菌约为 100：10；一般工业发酵培养基的碳氮比约为 100：（0.2 －2.0）；但在氨基酸发酵中，因为产物中含氮多，所以碳氮比就要相对低一些。例如谷 氨酸生产中大约 85%的氮源用于合成谷氨酸，15%用于合成菌体。取碳氮比 100：（15 －21），若碳氮比为 100：（0.5－2.0），则会出现只长菌体，而出现几乎不合成谷氨酸的 现象[3]。 所以，进料的多少和成分比例，在工业发酵生产过程中，成为一个非常重要的步骤。 进料过少，微生物代谢产物就会变少，即产率下降；进料过多，不但浪费了原料，增加 了成本，还有可能使微生物代谢产物的副产品增加，影响了产品的纯度。 在进料中，葡萄糖和尿素作为碳源和氮源是两个重要的原料。一般来说，原料的进 料速度是事前计算好的。发酵开始阶段，当微生物的数量限制着原料的转化率时，原料 的加入是指数性的增加；而当发酵罐的特征（氧气传递速率或冷却系统）限制着转化率 时，原料有着固定的进料速率。而一旦进料速率超过了发酵的“门槛”时，事先计算好 的原料速率就不得不进行纠正。然而，在工业生产中，原料的进料不能在线测量，往往 通过其它特征，例如副产品的生产或一个很高的呼吸商来判断。尽管这些特征容易测得， 但是由于传输现象的延迟性，只能用在不需要快速测量的生产中。葡萄糖进料控制的应 用已被研究过，或者和同反应缓慢的气体分析结合[4]，效果不是很好。这里以罐式发酵 罐，谷氨酸杆菌的发酵为例，研究了量热方法在不同时间，葡萄糖和尿素进料与各个微 生物参数之间的关系。 实验与讨论 本次实验是以谷氨酸棒状杆菌发酵为例，菌种由中国工业微生物菌种保藏