北五味子中多糖含量的测定.docVIP

　　北五味子中多糖含量的测定 作者：谭晓虹 王治宝 李如章 【摘要】 目的：建立测定北五味子中多糖含量的 方法 。方法：采用比色法测定北五味子中多糖含量。结果：测得北五味子中多糖含量为6.57%,平均回收率为99.78%,RSD=1.54%。结论：该方法简便，精密度及重现性均较好。 【关键词】 北五味子；多糖；含量测定 【ABSTRACT】 Objective: To establish a method for the determination of the polysactharide content in Schisandrachinensis Turcz. Methods: The polysaccharide content in Schisandrachinensis Turcz is determined by using the method of paring colors. Results: The polysachardes content in north ple. the result is stable and reproducible. So the result is satisfactory. 【KEY ination of the content 北五味子（Schisandrachinensis Turcz）是木兰科植物五味子的干燥成熟果实，是中医常用药材之一，具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精之功效。 现代 药理 研究 证实五味子对中枢神经系统、呼吸系统均有兴奋作用，亦能促进肝糖原异生，加快肝糖原分解，在 治疗 神经衰弱、肝炎等的药物中 应用 十分广泛。五味子有南北之分，据《本草纲目》记载“五味子南产者红，北产者黑，入滋补药，必用北者为良”，北五味子的化学成分主要为五味子木脂素、挥发油、五味子醇、多糖等[1]。本文采用苯酚—硫酸法测定北五味子中多糖的含量，得到满意的结果。 1 仪器与药品 北五味子购于张家口市药材公司经鉴定为北五味子，其它试剂均为国产 分析 纯 UV752分光光度计（上海第三仪器厂） GOA型电热真空干燥箱（天津东郊机械加工厂） RE52A型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂） 2 方法与结果 2.1 葡萄糖标准溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖25.18mg，用蒸馏水溶解并定容到250ml即为100.72μg/ml的葡萄糖标准溶液。 2.2 苯酚溶液的配制 取苯酚100g，加铝片0.1g和NaHCO30.05g，蒸馏，收集182℃馏份,称取7.5g，加水150ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。 2.3 标准曲线绘制 精密量取葡萄糖标准溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ml置具塞试管中，分别加蒸馏水使成1.0ml，再分别加入5%苯酚溶液1.0ml，摇匀，然后加浓H2SO45.0ml，充分摇匀，于室温下放置5min，置水浴中加热15min，取出冷却至室温。另以蒸馏水同上操作为空白对照，在490nm处测定吸光度，绘制标准曲线，建立回归方程：A=0.06781C+0r=0.9989。 2.4 多糖的提取及精制 北五味子粉碎后，称取500g，用清水洗净，加水4500ｍl，微沸煎煮1h，过滤，滤渣加水2000ｍl，煎煮1h，过滤，合并提取液，加热浓缩至300ｍl。加入乙醇使乙醇含量为80%放置12h，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤。得到棕色粗多糖。将粗多糖溶于水，用Seveg法除去蛋白，加入0.1%活性炭脱色，抽滤，滤液加入乙醇使溶液含乙醇达80%，静置过夜，抽滤，残渣用无水乙醇、丙酮反复洗涤，真空干燥，即得精制北五味子多糖。 2.5 换算因子测定 精确称取60℃干燥恒重的五味子多糖20mg，加水溶解后容量瓶中定容在100ml，摇匀，作为多糖储备液。精确量取多糖储备液0.20ml，加水至1.00ml，按测定标准曲线同样的 方法 测其吸光度值，根据标准曲线 计算 浓度。按下式计算换算因子：f=l-1)，D为多糖的稀释因子，测得f=1.691（n=6）。 2.6 样品含量的测定 精密称取五味子粉末200mg，用80%乙醇浸泡过夜，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h，抽滤，弃去滤液，残渣继续以蒸馏水回流提取2h，抽滤，滤液反复洗至250ml容量瓶中，定容，摇匀成为样品液。测定时，精密吸取样品液1.00ml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值，按下式计算多糖含量（以粗多糖计）：多糖含量%=CDf×100/l-1)，D为样品溶液的稀释因子，f为换算因子，l（6份）再分别精密加入不同量的标准溶液，依样品测定方法测定吸光度，计算回收率平均值为99.78%，RSD=1.54%。表2 回