反相高效液相色谱法测定竹沥达痰丸中黄芩苷的含量.docVIP

　　反相高效液相色谱法测定竹沥达痰丸中黄芩苷的含量 【摘要】 　　目的建立反相高效液相色谱（RPHPLC）法竹沥达痰丸中有效成分黄芩苷含量的测定方法。方法采用HPLC法，色谱柱为ZORBAX ExtendC18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)，流动相为甲醇水磷酸（47∶53∶0.2），检测波长为316 nm。结果黄芩苷线性范围10.04～77.2 μg/ml，r=0.999 8 (n=7)；回收率为100.5%（n=6），RSD为1.22%。结论测定方法简便、稳定，能有效地控制该制剂的质量。 【关键词】 竹沥达痰丸 黄芩苷 反相高效液相色谱法 　　Abstract：Objective To establish a measurement method of baicalin, the effective ponent of Zhulidatan Pills. MethodsThe isolation n(4.6 mm×150 mm,5μm), the mobile phase consisted of methanol-. Results The content of baicalin shol，r=0.999 8 (n=7), and the average recovery ethod is simple,stable, and can effectively control the quality of the preparation. 　　Key m×150 mm,5 μm)色谱柱，G1379A四元泵，G1314A Vettler Toledo PB1502-S 电子 天平，Mettler Toledo AG204电子分析天平，超声处理器（上海船舶电子设备研究所）。 　　1.2 试药 　　黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110737200312，供含量测定用）；甲醇（色谱纯）；其余试剂均为分析纯；水为双蒸水。 　　1.3 样品 　　竹沥达痰丸（某药厂批20060910。 　　 2 方法与结果 　　2.1 色谱条件与系统适用性实验 　　用十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇－水－磷酸（47∶53∶0.2）为流动相；检测波长316 nm；柱温室温。理论板数按黄芩峰 计算 应不低于3 000。 　　2.1.1 对照品溶液的制备 　　精密称取在60℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品适量，加50%甲醇制成每毫升含30 μg 的溶液，即得。 　　2.1.2 供试品溶液的制备 　　取丸剂，研细，精密称取1.8 g置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 ml，称定重量，超声处理（功率320 in，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液1 ml，置10 ml量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.1.3 测定法 　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20 μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。 　　2.2 检测波长的确定 　　以50%甲醇水为空白，对黄芩苷标准溶液进行紫外扫描，结果表明黄芩苷在280 nm及316 nm处有最大吸收，重复测定其在316 nm处的吸收度，结果表明在316 nm处测定稳定性好，因此液相色谱法中吸收波长确定为316 nm。见图1～2及表1。表1 黄芩苷标准溶液在λ＝316 nm处重复测定的吸收度（略） 　　2.3 线性关系考察 　　对照品溶液的制备：精密称取在60℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品19.3 mg，置于250 ml量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为77.2 mg/ml的黄芩苷标准品储备溶液，然后依次精密量取浓度为77.2 mg/ml的黄芩苷标准储备溶液1.3，2.6，4.0，5.2，6.5，8 ml于10 ml容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10.036，20.072，30.88，40.144，50.18，61.76，77.2 mg/ml的系列黄芩苷标准溶液。按上述色谱条件分别精密吸取标准品溶液各20 μl进样测定，以色谱峰面积为纵坐标，样品浓度为横坐标回归得标准曲线为：A=40.781C-8.699 8 ，r=0.999 8。表明在浓度10.04～77.2 μg/ml范围内黄芩苷的峰面积与浓度线性关系良好。黄芩苷标准曲线见图3。 　　2.4 精密度实验精密吸取供试品溶液20μl进样测定，一天内重复进样操作6次，约1 h/次，测得各次峰面积分别为1953.5，1946.2，1929.4，1931.3，1893.2，1878.5 计算 峰面积的RSD为1.47%，表明样品利用该方法一天内测定精密度满足要求，但含量有下降趋势，提示样品处理后