异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定.docVIP

　　异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定 【摘要】 目的 研究 异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为,建立异鼠李素含量测定的新 方法 。方法采用循环伏安法检测异鼠李素在电极上的电化学行为,以差示脉冲伏安测定其含量。结果异鼠李素发生单 电子 、单质子的氧化还原反应,该反应为有吸附特征的可逆过程。在pH 4.0磷酸缓冲液中,氧化峰电流与异鼠李素浓度在2.0×10-7~3.0×10-6 mol/L呈良好的线性关系,检测限为2.5×10-8 mol/L。结论碳糊电极可有效消除样品中其他组分对异鼠李素测定的干扰,可用于实际样品的测定。 【关键词】 鼠李素 位测定法 电极 异鼠李素(isorhamin)是一种多羟基黄酮类化合物,为一些中草药的有效成分,具有较好的抗心肌缺氧、缺血、缓解心绞痛、抗心律失常、抗氧自由基、降低血清胆固醇等多种心血管效应[12]。近20年来只有少量种类的黄酮类化合物的电化学性质被研究和 应用 [3]。多羟基黄酮类在电 分析 领域的应用已经引起关注[4]。碳糊电极具有电位范围宽、制备方便、价格低廉等特点,在伏安法中得到广泛应用[5]。笔者研究在碳糊电极上伏安法直接测定异鼠李素的方法,探讨该化合物在碳糊电极上的伏安性质和电极反应机制,采用差示脉冲伏安法测定心达康片中黄酮的总含量。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1仪器电化学分析仪(CHI660B,上海辰华仪器公司);采用三电极体系,工作电极为碳糊电极,对电极为铂丝电极,参比电极为AgAgCl电极;精密酸度计(pHS3B型,上海雷磁仪器厂);医用数控超声波清洗器(KQ250DE型,昆山市超声仪器有限公司);搅拌器(JB1型,上海雷磁新泾仪器有限公司);电子分析天平(BS110S型,德国Sartorius公司)。 1.1.2试剂异鼠李素标准品( 中国 药品生物制品检定所),用无水乙醇配制成1.0×10-3 mol/L储备液,避光保存;磷酸缓冲液(PBS):由50 mmol/L NaH2PO4Na2HPO4和20 mmol/L NaCl配制,用50 mmol/L H3PO4和NaOH溶液调至pH 2,3,4,5,6,7.4。所用试剂均为分析纯,实验用水为二蒸水。心达康片样品(四川雅达药业股份有限公司,批号:050503）,总黄酮标示量每片5 mg。 1.2方法 1.2.1制备碳糊电极参照 2.2差示脉冲伏安法测定条件选择 2.2.1pH值溶液pH值对异鼠李素的峰电流存在显著 影响 ,碱性条件下峰电流??小,酸性条件下峰 A:扫描速度(a→g依次为20,40,60,80,100,120,140 mV/s); B:扫描速度与峰电流的关系. 图3扫描速度对异鼠李素循环伏安图的影响 Fig 3CV curves of isorhamin on carbon paste electrode at the different scan rate 电流明显升高,且波形较好,灵敏度高,因此选择pH 4.0的PBS缓冲液作为支持电解质。 2.2.2富集时间按照1.2.2 方法 ,比较开路静止富集和开路搅拌富集对峰电流的影响。在开路搅拌富集2 min后,峰电流最大且保持恒定,说明异鼠李素在电极表面的吸附达到饱和,选择开路搅拌富集2 min后测定。 2.2.3表面活性剂在测定体系中分别加入浓度均为1%(V/V)的阳离子型表面活性剂CTMAB,非离子型表面活性剂TL,异鼠李素Ipa均明显下降,其中,以加入阴离子型表面活性剂的下降最明显,进一步表明异鼠李素电极反应的吸附性质。分别配制不同浓度NaCl的PBS底液,同法测定异鼠李素的氧化峰电流,异鼠李素在碳糊电极上的电化学行为受离子强度的影响较小。 2.2.4干扰实验在含1.0×10-6 mol/L异鼠李素的测定条件下(相对误差±5％),20倍量的L胱氨酸、DLα氨基丙酸、50倍量咖啡因、L谷氨酸,β环糊精、葡萄糖、乳糖以及饱和淀粉水溶液等不干扰测定,即碳糊电极具有较好的选择性。 2.3线性范围及检出限以差示脉冲伏安法分别测定不同浓度异鼠李素标准溶液的氧化峰电流(图4A),以峰电流对异鼠李素的浓度作图,在2.0×10-7~3.0×10-6 mol/L峰电流Ipa与异鼠李素浓度(C)呈良好的线性关系(图4B),回归方程为Ipa(μA)=0.0377C(μmol/L)+0.9852,r=0.9962,检测限为2.5×10-8 mol/L。 2.4稳定性、精密度和回收率将新配制的溶液立即测定或放置一段时间后测定,其氧化峰电位和电流在2 h内无明显变化。对1.0×10-6 mol/L的异鼠李素溶液,按照1.2.2方法,连续测定10次,峰电流RSD=2.3%。在样品溶液中分别加入异鼠李素标准溶液10