引种栽培与原产地珐菲亚中总皂苷的微波提取及含量测定.docVIP

　　引种栽培与原产地珐菲亚中总皂苷的微波提取及含量测定 作者：覃文流，杨东爱，凌征柱，蓝祖栽，刘园 【摘要】 　　目的建立比色法测定珐菲亚中总皂苷的含量，为珐菲亚的质量控制提供依据。方法以齐墩果酸为对照品，用香草醛-冰醋酸，高氯酸试剂显色反应，在542 nm 处有最大吸收。分别考察回流法提取法、超声波萃取法及微波萃取法。选择最优提取工艺，对样品进行含量测定。结果 齐墩果酸在0.005 8～0.029 mg/ml范围内呈良好的线性关系。平均回收率和RSD分别为100.05%和1.31%。方法学考察各项指标均符合要求。结论该法简便、准确，稳定性、重现性好。 【关键词】 总皂苷 微波提取 比色法 　　Abstract:ObjectiveTo establish the colorimetric assay for the content determination of total saponins in Pfaffia paniculata, . The backset current extraction, ultrasonic-assisted extraction and microum extraction and the quantitative analysis of specimen ade. ResultsIn the range of 0.005 8～0.029 mg/ml oleanolic acid ean recovery rate ethodology.ConclusionThe method is simple and convenient. It has high accuracy and good reappearance. 　　Key etric assay 　　随着人们生活质量的不断提高,延缓衰老，健康长寿已成为人们日益重视的话题。苋科植物以其极高的营养价值和药用价值近年来引起了人们的普遍关注。珐菲亚为苋科牛膝属(Amaranthaceae)植物珐菲亚Pfafftapam culata的根［1］，俗称巴西人参。主产巴西等热带雨林地区国家， 中国 没有分布，但我们对其引种通过生物技术组织培养方法获得了大量种苗的同时，进行了栽培并取得成功［2，3］。因其含有丰富的营养成分和珍贵的保健成分而日益成为研究热点。其具有清热解毒，强精壮阳、利尿止痛的功效，用于 治疗 不育症，停经或月经不调等症状，还可用于高胆固醇血症和解毒，对寒症、低血压、年老体弱者效果尤佳。珐菲亚的化学成分主要含有珐菲亚酸(pfaffia acid) 及其苷类、三萜类(nortr-perpene) 及其苷类，脱皮甾醇类激素(如蜕皮甾酮ecdysterone) 及苷类等［4］。化学成分分析表明，珐菲亚中疗效保健成分主要是皂苷类物质。本实验采用比色法对珐菲亚中总皂苷含量进行测定，为珐菲亚的质量控制提供 科学 数据。 　　 　　 1 仪器与试?? UV2401型分光光度计(日本岛津)；KQ250B型超声波清洗器；粉碎机。MASI型常压微波反应器(上海新仪微波化学科技有限公司)。 　　齐墩果酸购自中国药品生物制品检定所(批号07099803)。试剂均为分析纯。珐菲亚药材由广西药用植物园直接从产地采收，均由广西药用植物园凌征柱教授鉴定。 　　 2 方法与结果 　　2.1 溶液的制备 　　2.1.1 标准溶液制备精密称定齐墩果酸对照品，加甲醇配制成0.29 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。 　　2.1.2 供试品溶液的制备精密称取干燥恒重的珐菲亚粉末(2号筛)2 g，于250 ml烧瓶中，加入80%乙醇50 ml，按微波、超声、回流3种不同提取方法进行提取，滤过，取续滤液25 ml，水浴蒸干后加水10 ml溶解，用水饱和过的正丁醇萃取3次，15ml/次，合并正丁醇萃取液，再用15 ml正丁醇饱和过的水洗涤，收集正丁醇液，挥去正丁醇后以甲醇溶解，置50 ml容量瓶中，并用甲醇定容至刻度。 　　2.2 测定波长的选择 　　取0.5 ml的齐墩果酸对照液，于水浴蒸发至干，加入新配制的5%香草醛-冰醋酸0.2 ml，高氯酸0.8 ml，密塞，于70℃ 水浴显色15 min后，流动水冷却至室温。加醋酸乙酯5 ml，摇匀，立即在紫外分光光度计于400～800 nm波长下扫描，同时空白溶液作参比，在542 nm处有最大吸收，由此确定检测波长为542 nm。 　　2.3 线性关系考察 　　精密吸取上述对照品溶液 0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50 ml，水浴蒸发至干，加入5%香草醛-冰醋酸(临用新配)0.2 ml，高氯酸0.8 ml，于70℃水浴显色15min后,置流动水中冷却至室温。加醋酸乙酯5 ml