当归对X线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响.docVIP

　　当归对X线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响 作者：李宗山，李恒元，李泉，王志强，邱世翠 【摘要】 　　目的 观察当归对Χ线辐射损伤小鼠造血功能恢复的影响。方法用100%当归浸出液定期给小鼠灌胃，5d后，用Χ线照射0.11 CGY，1次/d，共照射5次，检测小鼠骨髓细胞增殖和抗体的产生。结果用药组小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生有显著增强作用，与照射组相比均有非常显著性差异（Plt;0.001）。结论 当归有明显抗X线辐射、促进小鼠骨髓细胞增殖和抗体产生的作用。 【关键词】 当归 骨髓细胞增殖 抗体 小鼠 　　AbstractObjectiveTo research the effect of Angelica sinensis Diels, (ASD) on hemopoietic rehabilitation of radiated mice . MethodsFilled the stomaches of the mice ice arroarroarroarrol，温火煎煮2 h，去渣浓缩为200ml备用。美国Multiskan产全自动酶标仪；CO2培养箱由美国Forma公司生产；美国产(IE.USA)冷冻离心机；超净工作台由苏州净化设备厂生产；日本东芝DGTT为FLUKA公司产品；二甲基亚砜(DMSO)为苏州化工研究所生产；RPMI-1640为美国GIBCO公司产品。 　　1.2 动物分组与给药 　　BALB/C小鼠 36只，体重18～22 g，雌雄兼有,购于北京医科大学实验动物中心。将动物随机分3组，每组12只。Ⅰ组为生理盐水对照正常组；Ⅱ组为 盐水加照射组；Ⅲ组为当归药物加照射实验组。Ⅰ，Ⅱ组每天用生理盐水灌胃，0.5 ml/次，1次/d；Ⅲ组每天用当归液灌胃，0.5 ml/次，1次/d；Ⅱ，Ⅲ组于第6天在灌胃后30 min行全身暴露Χ射线 照射，用等效方野18 cm×18 cm，焦点-鼠距80 cm。每天照射0.11CGY，1次/d，共照射5次。 　　1.3 检测指标及方法 　　1.3.1 骨髓细胞增殖反应［1］ 　　颈椎脱臼处死小鼠，无菌操作取小鼠双股骨骨髓细胞，调细胞浓度至5×106/ml，取100 μl加入96孔细胞培养板中，设5个复孔，置37℃，5% CO2 培养箱中培养72 h，终止前5 h，掺入MTT（5 mg/ml）10 μl/孔，终止培养时离心弃上清，每孔加入100 μl DMSO 溶解MTT还原产物甲臜（Formazan）溶解缓冲液，充分震荡10 min，全自动酶标仪用560 nm波长测OD值，以OD值代表骨髓细胞活性。 　　1.3.2 定量溶血分光光度测定法(QHS)［2］ 　　本法体外B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量（以OD值表示），其结果可反应机体体液免疫功能。实验第5天分别将5%的绵羊红细胞0.2 ml注入各组小鼠腹腔内，第11天眼球放血，颈椎脱臼致死，常规取脾脏，然后进行脾细胞计数，调细胞浓度至1×107/ml，取脾细胞1ml，1∶10新鲜豚鼠血清（补体）1 ml，0.2%绵羊红细胞（SRBC）1 ml，混匀，37℃水浴1 h，1 500 r/m离心10 min，取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450 nm波长处测A值，作为QHS反应值。 　　1.4 统计学方法 　　实验结果采用组间均数差异t检验的方法进行统计学分析。 　　 2 结果 　　当归对小鼠骨髓细胞增殖、抗体产生的影响见表1。表1 当归对小鼠骨髓细胞增殖、抗体产生的影响(略) 　　 3 讨论 　　当归是临床上常用的中药， 现代 研究［3］证实，当归有明显的抗辐射损伤作用。用当归对辐射损伤的家兔进行腹腔注射，引起家兔染色体畸形变率明显下降，连续注射9 d，家兔染色体畸变率完全恢复正常，体外用药实验结果与体内注射结果相同。对Co-γ射线辐射损伤后的小鼠通过腹腔给予当归注射液，连续给药80 d后发现，受辐射损伤后的卵巢于照射后第15天开始进入恢复期，比未给当归的对照组显著提前。当归多糖对受照小鼠的造血细胞亦有辐射防护作用，照射前注射当归多糖能促进照射小鼠???脏内源性造血灶形成，提高受照小鼠骨髓有核细胞计数，当归多糖对CFV-C和CFV-S的放射敏感性影响较少，但能防止照射后效应，能显著促进小鼠CFV-C和CFV-S的恢复，这可能是其抗辐射作用原理之一。水浸液灌饲小鼠，能显著促进血红蛋白及红细胞的生成，其抗贫血作用可能与所含的维生素B12、烟酸、叶酸、亚叶酸等有关。从上述实验中可以看出，当归可刺激小鼠抗体的产生，使抗体分泌量增加，与照射组相比有非常显著性差异(Plt;0.001)。当归对骨髓细胞增殖有明显促进作用，与照射组相比有非常显著性差异(Plt;0.001)。骨髓细胞增殖归之于集落