扶正化淤方对四氯化碳肝纤维化大鼠基膜型基质金属蛋白酶活性的影响.docVIP

　　扶正化淤方对四氯化碳肝纤维化大鼠基膜型基质金属蛋白酶活性的影响 作者：崔红燕，刘成海，孙保木，刘成 【摘要】 　　目的探讨扶正化淤方通过影响基膜型基质金属蛋白酶活性而抗肝纤维化的作用机制。方法四氯化碳(CCl4)皮下注射与高脂低蛋白饲料复合建立大鼠肝纤维化模型。随机分为正常组、模型组与扶正化淤方药物干预组。药物组自造模之日起以扶正化淤方稀释液灌胃，共用药6周。HE染色观察肝组织炎性病理变化，天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积，盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸含量，A、Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-2和MT-MMP1蛋白表达水平；明胶酶图法检测肝组织MMP-2/9活性。结果与正常大鼠比较，模型大鼠血清肝功能异常、肝组织炎症明显、肝组织IV型胶原表达与沉积增加，α-SMA、Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-2和MT-MMP1蛋白表达升高，而MMP-2/9活性水平明显上升。扶正化瘀方显著改善模型大鼠血清肝功能、减轻肝脏炎症和胶原沉积；减少肝星状细胞活化；抑制Ⅳ型胶原蛋白表达和沉积；降低MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP蛋白表达；抑制MMP-2/9活性。结论扶正化瘀方可通过抑制MMP-2的激活与活性水平，并减少Ⅳ型胶原沉积，而起到减轻肝组织的破坏与重构而发挥抗肝纤维化的作用。 【关键词】 扶正化淤方 基质金属蛋白酶 基膜型 肝纤维化 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of Fuzheng Huayu recipe (FZHY recipe) on the activity of membrane-type matrix-metalloprotEinases and its mechanism in the treatment of liver fibrosis. MethodsLiver fibrosis ly divided into 3 groups：normal，model control and Fuzheng Huayu decoction treated group. For the treated group，rats inistered mation in liver ined by HE staining,Collagen deposition in liver easured alls methods; protein expressions of α-SMA, collagen IV，MMP-2, MMP-9 and TIMP-2 ography.Resultspared al group，abnormal liver function, obvious hepatic inflammation, excess collagen deposition, high protein expressions of collagen IV， MMP-2/9， TIMP-2 and MT1-MMP, and increased activities of MMP-2/9 odel group. pared odel group, FZHY recipe significantly improved the rat liver function, alleviated liver inflammation and the excess collagen deposition.In addition, it also significantly doage and regeneration of liver. 　　Key brane-type； Liver Fibrosis 肝纤维化是诸多慢性肝病的共同病理特点，以肝脏细胞外基质(extracellular matrix，ECM)代谢失衡，生成超过降解，并大量沉积于肝组织为特征。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）在ECM降解与肝纤维化逆转过程中起重要作用。扶正化瘀方具有良好的抗肝纤维化的疗效，其机理包括抗肝细胞脂质过氧化损伤、抑制肝星状细胞活化等［1，2］ 。既往我们也曾报道该方对间质性MMPs活性的影响［3］ 。本研究制备CCl4肝纤维化模型，旨在探讨扶正化淤方通过影响基膜型MMPs活性和酶原活化调节因子而抗肝纤维化的作用机制。 　 　1 材料 　　1.1 动物 　　A)单克隆抗体，Dako公司产品。兔抗人MMP-2多克隆抗体，购自武汉博士德生物工程公司。小鼠抗人MMP-9和金属蛋白酶组织抑制物-2（tissue inhibitors of metalloproteinase-2，TIMP-2）单克隆抗体、小鼠抗人Ⅳ型胶原单克