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泰山四叶参多糖的提取及含量测定.doc
泰山四叶参多糖的提取及含量测定
作者:王德才, 李同德, 高丽君
【摘要】 目的从泰山四叶参中提取多糖并测定多糖含量。方法经脱脂、醇提后,用水提醇沉法提取多糖,用苯酚-硫酸法测定其含量。结果泰山四叶参中多糖含量为12.45%,平均回收率为99.12%,RSD=1.49%(n=4)。结论泰山四叶参多糖含量较高,具有开发利用价值。
【关键词】 四叶参; 多糖; 提取
Abstract:ObjectiveTo extract the polysaccharide and measure the content in Radix Codonopsis Lanceolatae from Mountain Taishan.MethodsThe polysaccharide ethod, and the polysaccharide content easured ethod.ResultsThe polysaccharide content in Radix Codonopsis Lanceolatae Mountain Taishan contains plentiful polysaccharide, and it has much economic value.
Key ination
四叶参Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.F.又名轮叶党参、羊乳、山胡萝卜等,系桔梗科党参属多年生草质缠绕藤本植物,在我国主要分布于东北地区,在泰山山系也有分布。四叶参为药食两用植物,在民间采其春季幼苗或根作山珍食用,美味可口。传统上其根入药,具清热解毒、止咳祛痰、补虚通乳、健身补气等功效,用于肺痈咳嗽、病后虚弱、产后缺乳等症,系泰山四大名药之一[1]。泰山四叶参的块根中含丰富的糖类化合物,但缺乏研究。本实验 参考 经测定,3份多糖储备液平均吸光度为0.162,从回归方程中求出多糖液中折合葡萄糖的浓度为14.88 μg·ml-1。按下式 计算 换算因子:
F=l-1),D为稀释因素。测得F=1.344 1。
2.4 泰山四叶参多糖含量的测定精密称取泰山四叶参粉末0.5 g 3份,分别置圆底烧瓶中加80%乙醇150 ml回流提取2 h,趁热抽滤,滤渣用80%乙醇洗涤3次。然后滤渣连同滤纸置烧瓶中,加蒸馏水150 ml,95℃水浴加热提取2 h,趁热抽滤,用热水洗涤烧瓶和滤渣,洗液并入提取液中,待冷后转移于250 ml容量瓶中,补加蒸馏水定容至刻度,如此制作样品溶液3份,置冰箱中备用。
精密吸取样品溶液0.2 ml,按标准曲线制作方法测定其吸光度。每份样品溶液重复操作2次,取平均吸光度。3份样品溶液的平均吸光度分别为0.218,0.209,0.212,平均0.213。从回归方程中求出样品溶液中折合葡萄糖浓度为18.53 μg·ml-1。按下式计算四叶参中多糖的百???含量。
多糖含量(%)=C·D·F/l-1),D为稀释因素。计算泰山四叶参中多糖含量为12.45%。
2.5 回收率测定采用加样回收法。取样品溶液0.2 ml 4份,分别加入葡萄糖标准液10,20,40,60 μl,按标准曲线制作方法测定其吸光度,根据葡萄糖的检出量,计算其回收率。
回收率(%)=(实验测值-供试品液多糖量)/葡萄糖加入量×100%。测得平均回收率为99.12%,RSD=1.49%(n=4)。
2.6 稳定性实验将供试品溶液完成显色后,每隔0.5 h测吸光度(A)1次,连测5次。结果表明2h内稳定性良好,以A值计算,RSD=1.27%(n=5)。
3 讨论
多糖是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子聚合物,是构成生命的分子基础之一,是 自然 界含量最丰富的生物聚合物。人们陆续发现,多糖不仅作为广谱免疫促进剂,具有免疫调节功能,还在抗肿瘤、抗病毒、抗炎、降血糖、降血脂、抗辐射等方面具有广泛的药理作用[4]。研究表明,我国东北产四叶参提取物具有镇咳、镇痛抗炎、抗疲劳、抗氧化、抗衰老、降血脂等作用,其中不少药理作用与其多糖有密切关系[5]。多糖的测定方法很多,本实验通过脱脂,以80%乙醇提取以除去单糖、寡聚糖、苷类及生物碱等醇溶成分,再用水提醇沉法分离??糖成分,并以苯酚-硫酸法测其含量。通过回收率实验和稳定性实验可知,本法所测多糖含量,简便可靠、重复性好、显色稳定。实验结果表明泰山四叶参中多糖含量为12.45%,但其化学成分、理化性质及药理活性还有待于进一步研究。
【 参考
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