结肠肿瘤组织中MMP.docVIP

　　结肠肿瘤组织中MMP 【摘要】 目的：观察正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结肠癌组织中MMP-2和MMP-7的表达，探讨两种蛋白表达在结肠肿瘤发生、侵袭及转移中的意义。方法：采用RT-PCR方法检测40例结肠腺瘤、60例结肠癌肿瘤组织和周围正常黏膜组织中MMP-2、MMP-7的表达，进行半定量分析。结果：结肠腺瘤组织中的MMP-2表达水平高于正常黏膜（Plt;0.05），结肠癌组织中MMP-2和MMP-7的表达水平均高于结肠腺瘤和正常黏膜（P均lt;0.05），Ⅲ、Ⅳ期结肠癌组织MMP-2、MMP-7的表达水平高于Ⅰ、Ⅱ期（Plt;0.05），Ⅳ期结肠癌组织MMP-2、MMP-7的表达水平高于Ⅲ期（Plt;0.05）。结论：MMP-2和MMP-7的高表达可能与结肠肿瘤的侵袭和转移有关，但其高表达的机制尚需进一步探讨。MMP-7水平的检测可用于结肠癌的早期诊断。 【关键词】 结肠肿瘤·基质金属蛋白酶 [ABSTRACT] Objective: To investigate the expression of matrix metalloprotEinase-2 （MMP-2） and matrix metalloprotEInase-7（MMP-7） in colon adenoma and colon cancer. Methods: Forty tissue samples of colon adenoma and 60 of colon cancer al colonic tissues the same subjects. The mRNA expression levels of MMP-2 and MMP-7 iquantitative reverse transcription polymerase chain reactions. Results: The expression level of MMP-2 in the colon adenoma al colonic tissues （Plt;0.05）. The expression level of MMP-2 and MMP-7 in the colon cancer a and normal colonic tissues（Plt;0.05）. In colon cancer tissues, the expression level of MMP-2 and MMP-7 in stage Ⅲ and Ⅳ ation， invasion and translation of colon neoplasm. The mechanism of higher expression need more exploration. [KEY atrix metalloproteinases 　　肿瘤细胞降解细胞外基质（extracellular matrix，ECM）是肿瘤生长和转移过程中的重要步骤，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）通过降解ECM参与肿瘤的生长和转移。本研究通过观察正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结肠癌组织中MMP-2和MMP-7的表达，探讨两种蛋白的表达与结肠肿瘤形成、侵袭和转移的关系。 1　资料与方法 1.1　一般资料　收集2004年5月—2007年10月我院结肠腺瘤标本40例，年龄25~68岁，平均年龄40岁；结肠癌标本60例，年龄28~75岁，平均年龄48岁，其中TNM分期Ⅰ期10例、Ⅱ期18例、Ⅲ期22例、Ⅳ期10例。术中或纤维结肠镜活组织检查时留取肿瘤组织和距肿瘤边缘10 cm以上的正常组织，在20～30 min内置于-80 ℃冰箱内冻存。所有标本均经病理组织学明确诊断并且进行病理分期。 1.2　主要试剂和方法　Trizol、MMLV、Taq酶等主要试剂及E1AF和内参β-actin的引物均购自上海生工生物工程有限公司。按Trizol试剂盒说明提取mRNA，经逆转录得到cDNA，PCR扩增，琼脂糖电泳照像。MMP-2引物为正义链5’-ACCTGGATGCCGTCGTGGAC-3’，反义链5’-TGTGGCAGCACC AGGGCAGC-3’，扩增片段的长度为447 bp； MMP-7引物为正义链5’-AGATGTGGAGTGCCAGAT-3’，反义链5’-TAGACTGCTACC ATCCGTCC-3’，扩增片段的长度为365 bp；β-actin的引物为正义链5’-GTG GGGCGCCCCAGGCACCA-3’，反义链5’-CTCCTTAATGTCACGGACGAT TT- 3’，扩增片段的长度为500 bp。PCR条件：94 ℃ 1 min，58 ℃ 1 min，7