维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠的治疗作用及机制.docVIP

　　维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠的治疗作用及机制 【摘要】 目的: 探讨维生素D3联合地塞米松对哮喘大鼠的 治疗 作用及其机制. 方法 ： 实验分为正常对照组（A组）、哮喘模型组(B组)、地塞米松组（C组）和维生素D3联合地塞米松治疗组(D组)，每组L致敏液（含OVA10 mg，灭活百日咳疫苗5×109个，氢氧化铝凝胶100 mg ）腹腔注射致敏；第8日：重复致敏1次；第15日开始B，C和D组大鼠置于密闭玻璃罩中以OVA雾化吸入诱喘，每次约20 min，每天诱喘1次，共3 d. 雾化时大鼠出现打喷嚏、呼吸急促、尿便失禁等症状，说明哮喘模型复制成功. A组在相同时间腹腔注射、雾化吸入等量生理盐水. A组和B组于激发前1 h给予生理盐水1 mg/kg腹腔注射，连续3 d；C组于每次激发前1 h给予地塞米松1 mg/kg腹腔注射进行干预，连续3 d；D组给予地塞米松1 mg/kg并参照　　2结果 　　2.1支气管BALF中细胞计数与分类大鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数及各种炎症细胞B组较A组显著增加（Plt;0.05，表1)，主要由巨嗜细胞、嗜酸粒细胞构成. 支气管肺泡灌洗液中细胞总数及嗜酸粒细胞C组和D组较B组显著下降（Plt;0.05)， D组与C组比较下降更为显著，差异具有统计学意义（Plt;0.05). 　　表1BALF细胞计数及分类（略） 　　aPlt;0.05 vs A； cPlt;0.05 vs B； ePlt;0.05 vs； C. A：正常对照组；B：哮喘模型组；C: 地塞米松组；D： 维生素D3合并地塞米松 治疗 组. 　　2.2大鼠血清IgE,IL4,IL5含量变化大鼠血清IgE,IL4和IL5含量B组与A组相比较均显著增高（Plt;0.05）， D组和C组较B组显著降低（Plt;0.05），D组含量降低更为显著，与C组相比差异具有统计学意义（Plt;0.05，表2）. 　　表2各组大鼠血清中IgE,IL4,IL5水平比较（略） 　　aPlt;0.05 vs A； cPlt;0.05 vs B； ePlt;0.05 vs C. A：正常对照组；B：哮喘模型组；C: 地塞米松组；D：维生素D3合并地塞米松治疗组. 　　2.3肺组织形态学改变光镜下观察结果显示，A组大鼠气道上皮完整，粘膜光滑，无纤毛脱落，肺泡腔内未见炎性渗出，黏膜下未见炎细胞浸润，气管平滑肌无增厚. B组支气管壁及支气管周围组织有多处红细胞聚集区，且有大量炎细胞浸润，包括淋巴细胞、嗜酸粒细胞、单核细胞等；气道黏膜上皮增厚，气道变窄，严重者可见脱落. D组小气道及肺泡壁结构完整，支气管和肺泡腔内分泌物以及肺组织炎性细胞浸润明显减少，无气道狭窄及气道上皮细胞脱落等现象. C组病理表现与D组相似，但炎性细胞减少较D组弱(图1). 　　A：正常对照组； B：哮喘模型组； C：地塞米松治疗组； D：维生素D3联合地塞米松治疗组. 　　图1各组大鼠肺组织病理改变HE ×100（略） 　　3讨论 　　支气管哮喘是嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞及其细胞成分参与的气道慢性炎症性疾病. T淋巴细胞Th1 /Th2失衡及Th2细胞功能亢进是哮喘等过敏性疾病的免疫基础. 目前 糖皮质激素仍是临床 应用 最普遍的抗哮喘药物由于长期应用激素副作用较大，因此，寻找有效抑制支气管哮喘粘膜慢性炎症的药物与糖皮质激素联合应用，是当前 研究 的热点. 　　近年来1,25(OH)2D3 受到广泛关注，它是维生素D 的活性形式，除了调节机体钙、磷代谢的动态平衡外，还参与机体免疫系统的分化和调节. 研究［7］证实，1,25(OH)2D3 是一种新的神经内分泌免疫调节激素，它在T 细胞及单核细胞水平均能 影响 细胞因子的分泌，并对Th1，Th2型细胞因子产生不同的调节效应，选择性抑制Th1 型细胞因子，从而改善HT的Th1 与Th2 细胞因子 网络 失衡，显示了其对Th1，Th2 型细胞因子分泌的严密而精细的调节作用. 1,25(OH)2 D3至少能在T细胞和单核细胞两个水平影响细胞因子分泌，并能对TH1、TH2型细胞因子产生不同的效应. 　　本研究结果发现，经维生素D3联合地塞米松治疗后大鼠气道内嗜酸粒细胞较哮喘组明显减少，提示维生素D3联合地塞米松能有效地控制哮喘气道炎症，可能的原因是由于嗜酸粒细胞的减少从而减少，其所释放的一系列炎性介质和细胞因子如LTB4,LTC4,LTD4及PAF等，在哮喘的发病机制中产生重要的作用. 　　本实验结果显示，维生素D3联合地塞米松可降低哮喘大鼠气道内炎症和大鼠血清中IL4，IL5和IgE的水平；维生素D3与糖皮质激素联合作用的效果优于单独应用糖皮质激素，从多途径，多环节上更好地控制气道炎症及炎性介质和细胞因子如IL