苯甲酸二聚铜配合物的合成与体外抗肿瘤作用.docVIP

　　苯甲酸二聚铜配合物的合成与体外抗肿瘤作用 【摘要】 目的 合成一种新的二聚铜配合物,探讨其体外抗肿瘤作用。 方法 由苯甲醛、乙醇、醋酸铜在水溶液中反应合成［Cu2(C7H5O2)4(C2H5O)2］;锥虫蓝细胞计数法观察其对K562细胞增殖的抑制作用。 结果 X-射线单晶衍射结构 分析 和红外光谱表征证明合成新的二聚铜配合物,该配合物对K562细胞的IC50为17.3 μg/mL。 结论 合成对K562细胞增殖具有一定抑制作用的二聚铜配合物。 【关键词】 二聚铜; 配合物; 抗肿瘤药; K562细胞 ABSTRACT: Objective To synthesis a neeric cupper(Ⅱ) plex and to investigate its antitumor activity in vitro. Methods The title pound ［Cu2(C7H5O2)4(C2H5O)2］ ethod or cell gro and single X-ray crystal analysis have revealed that pound has a dimeric structure and Mr = 703.66 g/mol. The plex inhibited the proliferation of K562 cells significantly and dose-dependently in 48 h, IC50 of K562 L by trypan blue dye exclusion method. Conclusion The neeric cupper(Ⅱ) plex synthesized has significantly antitumor activity in vitro. KEY I1640培养基及胎牛血清(美国Gibco公司);锥虫蓝(美国Sigma公司);苯甲醛(A.R)及乙酸铜(A.R)(上海松江振兴化工厂);D-(+)-氨基葡萄糖盐酸盐(B.R，SCRC，国药集团化学试剂有限公司)。 1.1.3 主要仪器 体积分数为0.05的CO2及饱和湿度孵育箱(美国Thermo Forma公司);无菌操作台(苏净集团安泰公司);96孔培养板(美国Corning Incorporated公司);倒置显微镜(日本Olympus公司);多头磁力加热搅拌器及数显水浴锅(HJ-4，常州国华电器有限公司);红外光谱仪(AVATAR 330FT-IR,美国Thermo Nicolet公司);CCD面探衍射仪(Siements SMART,美国Siements公司)。 1.2 方法 1.2.1 标题化合物制备 称取D-(+)-氨基葡萄糖盐酸盐(0.2 mmol,约0.40 g)加入蒸馏水10 mL中,搅拌使其完全溶解(溶液A)。量取苯甲醛(0.2 mmol,约2 mL)加入无水乙醇10 mL中,搅拌均匀(溶液B)。室温下搅拌将溶液A逐滴加入溶液B,持续搅拌3 h,所得溶液加入乙酸铜(0.2 mmol,约0.40 g)继续搅拌0.5 h。停止搅拌后立即置80 ℃水浴锅保温10 min,得到蓝色溶液,保险膜密封,静置数天,过滤底部析出物,滤饼用蒸馏水及乙醇多次洗涤得到蓝色晶体。 1.2.2 红外光谱表征 采用KBr压片法,用红外光谱仪在400～4000 cm-1范围内测定。 1.2.3 单晶结构测定和解析 选择适当规格的单晶,利用CCD面探衍射仪,采用石墨单色器单色化的MoKα射线(λ=7.107 nm),在室温下,在2.01 °lt;θlt;25.08 °的范围内收集衍射点,所有数据的 计算 在计算机上以SHELXTL-97程序包进行解析。 1.2.4 细胞培养 K562细胞培养条件为含体积分数为10%小牛血清RPMI 1640,青霉素(100 IU/mL)和链霉素(100 μg/mL),在37 ℃、体积分数为0.05的CO2孵育箱中培养。取对数生长期细胞用于抑制率测定实验,接种细胞浓度为2.5×105mL-1。 1.2.5 锥虫蓝细胞计数法观察药物对K562细胞增殖的抑制作用 在96孔培养板上,接种K562细胞,接种量每孔约5×104,每孔200 μL,实验设6组,加入药物终浓度分别为2.5,5,10,20,40,80 μg/mL。对照组不加药,每组设3个平行孔,37 ℃培养至48 h,取0.4%锥虫蓝液与细胞悬液各50 μL混匀后,再取适量混合液充于细胞计数板上,计数4个大格的未染色活细胞。 细胞生长抑制率(IR%)=(对照组细胞数－实验组细胞数)/对照组细胞数×100% 以同一药物的不同浓度的对数值对肿瘤细胞生长抑制率作图,可得到剂量-反应曲线,根据