补阳还五汤及拆方预处理对MIRI家兔氧化指标及心肌酶的影响.docVIP

　　补阳还五汤及拆方预处理对MIRI家兔氧化指标及心肌酶的影响 作者：李淑贞 张兰兰 顾宇 杨艳梅 王小宇 【摘要】 观察补阳还五汤及拆方对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。［方法］40只家兔随机分为5组：假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血通络组。分别预处理1周后，结扎左冠状动脉前降支建立心肌缺血再灌注损伤模型。测定血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量。［结果］与模型组比较，各用药组血清CK、LDH及MDA含量明显降低（P＜0.01），血清SOD的活性显著升高，且补阳还五汤组作用最明显（P＜0.05）。［结论］补阳还五汤及拆方可清除氧自由基，减轻心肌缺血再灌注损伤，补阳还五汤组的疗效明显优于拆方组。 【关键词】 补阳还五汤；拆方；缺血再灌注；氧化指标；心肌酶 本研究旨在观察补阳还五汤及拆方对MIRI家兔氧化指标、心肌酶的影响，探讨该方对MIRI的保护机制及其配伍 规律 ，从而为临床用药提供可靠的理论依据。 　　 1 材料与方法 　　1.1 药物与试剂 　　补阳还五汤：以《医林改错》原方所载的药味和配方比例，按每钱以3ｇ换算：生黄芪120ｇ，当归6ｇ，赤芍4.5ｇ，地龙、桃仁、红花、川芎各3ｇ，60kg人临床1日剂量。浸泡，煎煮，浓缩成160%的液体。补气液：黄芪120ｇ。浸泡、煎煮，浓缩成120%的液体。活血通络液，即补阳还五汤去黄芪。浸泡、煎煮，稀释成30%的液体。以上药物均购自沧州市同仁堂药店。MDA、SOD、LDH、CK试剂盒均购于南京建成生物制品研究所。 李淑贞，等: 补阳还五汤及拆方预处理对MIRI家兔氧化指标及心肌酶的影响 　　1.2 实验动物 　　健康新西兰大白兔40只，雌雄兼用，体重2～2.5kg，河北省实验动物中心提供，动物合格证号：809093。 　　1.3 实验方法 　　（1）分组与给药：40只家兔，自由饮水进食，饲养于18℃～22℃明暗各12h的清洁级动物实验室内，喂养一周后，随机分为5组，每组8只：假手术组、模型组、补阳还五汤组、补气组、活血通络组。实验开始每天行相应药物灌胃：补阳还五汤组：16g/（kg·d）；补气组：12g/（kg·d）；活血通络组：3g/（kg·d）；模型对照组及假手术组分别给予等量生理盐水灌胃。各组1次/d灌胃，每次用药体积均按10ml/kg 计算 ，连续7d。（2）模型制备：参照张氏方法［1］复制家兔心肌缺血再灌注模型：末次灌胃1h后，经外耳缘静脉注射25%乌拉坦（4ml/kg）麻醉动物，仰卧位固定在兔台上，沿兔的胸部正中线切开皮肤，钝性分离后紧靠胸骨左缘剪断2～4肋软骨，用小开胸器撑开胸腔切口，一方面加压止血，一方面打开手术视野，可见搏动的心脏，剪开心包，用止血钳将左心耳提起，用持针器将小弯针在冠状动脉前降支（LAD）根部（离冠状动脉起始约3～5mm）穿一丝线，深度约2mm，尽量减少对心肌的创伤，稳定15min，放置医用硅胶管（直径2mm）后一起结扎。持续40min后放松结扎线，恢复灌流。结扎后供血区心肌局部青紫，心电图ST段上抬，提示缺血模型复制成功；40min后放松结扎线局部心肌反应性充血，ST段下移，表明再灌注模型复制成功。假手术组胸部切开，仅在冠状动脉下方穿线，而不进行结扎，其他操作同模型对照组。（3）检测指标及方法：a心电图（ECG）的描记，将针型电极插入兔四肢，全实验过程连续观察Ⅱ导联心电图的变化。b生化指标测定实验结束后由颈总动脉抽取血液4ml，4℃、3000r/min离心10min，提取上清液。用SOD试剂盒、CK试剂盒、MDA试剂盒和LDH试剂盒，分别测定血清中相应酶的活性或含量。步骤完全按照试剂盒说明书操作。MDA采用硫代巴比妥酸法（TBA）测定，SOD含量采用黄嘌呤氧化酶法测定。 　　1.4 统计学处理　 　　所有数据均用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较用单因素方差分析和q检验。全部数据采用SPSS12.0统计软件分析。 　　 2 结果 　　2.1 各组ECG的变化 　　假手术组ECG在整个实验阶段较平稳，模型组当结扎冠状动脉时可见ST段均有不同程度的弓背上抬，T波高尖，呈急性心肌缺血图形，再灌注即刻ST段抬高较缺血更明显，部分出现室性早搏。而各 治疗 组在结扎冠状动脉即刻、10min时ECG的变化与模型组无明显差异，但随结扎时间延长及血供的恢复，上抬的ST段明显下降，尤以补阳还五汤组最为显著。 　　2.2 对心肌缺血再灌注兔CK和LDH活性的影响 　　与假手术组比较，模型组家兔结扎冠状动脉40min及再灌注90min后血清CK、LDH含量明显升高（P＜0.01）；经药物预处理后，各治疗组血清CK、LDH含量明显下降，与模型组比较有显著性差异（P＜0.01）